Діагностика ВІЛ-інфекції проводиться для встановлення остаточного діагнозу. Якщо пацієнт впевнений у інфікуванні, не слід займатися самолікуванням: необхідно звернутися до фахівця.
Під маскою СНІДу можуть ховатися багато захворювань, які виліковуються при зверненні до лікаря. Тести на інфекцію є найпоширенішим та раннім методом діагностики.
Визначення ступеня інфікування продовжується в лабораторії при здачі аналізу крові методом ІФА або ПЛР.
У зв'язку з погіршенням епідеміологічних показників щодо ВІЛ-інфекції, велике значеннянабуло раннього розпізнавання недуги. Лікар проводить диференціальну діагностику ВІЛ-інфекції, збирає епідеміологічні відомості про хворобу.
У процесі вивчення способів зараження фахівець проводить такі дослідження, як:
Методи діагностики ВІЛ-інфекції спрямовані на виявлення антитіл в ІФА, а при підтвердженні діагнозу фахівець проводить роз'яснювальну роботу з хворим про дотримання ним правил, щоб уникнути поширення недуги.
Тестування на СНІД призначається дітям, народженим від інфікованих матерів після проведеного антиретровірусного лікування. Скринінгові аналізи визначають антитіла до ВІЛ 1 та 2.
Імуноблот носить підтверджуючий характер і виявляє антитіла до білків ВІЛ-інфекції.
Рання діагностика імунодефіциту дозволяє хворому в короткий термін змінити спосіб життя, розпочати лікування та отримати психологічну допомогу. Характерні скарги пацієнта завжди допомагають лікарю запідозрити СНІД та направити кров пацієнта на дослідження до лабораторії.
Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції, що проводиться з тестами 4 покоління, дозволяє визначити недугу у гострій фазі хвороби. Тест Determine HIV-1/2 Ag/Ab Combo високочутливий до антигенів та антитіл у сироватці крові хворого. Специфічність дослідження становить 99,19% – за Ab-лінією, і 99,64% – за Ag-лінією, а позитивне прогностичне значення визначається в межах 55%.
Чутливість аналізу виявляється шляхом визначення раніше відомих результатів. При отриманні позитивних даних можливість помилкових цифр досягає 45%.
У домашніх умовах проводиться тест з мазка з порожнини рота. Дослідження комфортне, просте та безболісне для пацієнта. Тест-смужка «ІмуноХром-½-Експрес» застосовується для проведення аналізу, і забезпечує стабільний результат, якщо хворий дотримується інструкції, що додається до препарату. При виявленні двох однакових фіолетових смужок, розташованих у тестовій зоні та області контролю, тест вважається позитивним. Наявність однієї смужки розшифровується як негативний результат аналізу.
Час, витрачений дослідження, становить від 15 до 30 хв.
Поразка імунної системи відбувається за введення вірусу в організм пацієнта. Термін інкубаційного періоду коливається не більше 3 місяців.
Після небажаного та небезпечного контакту з партнером необхідно здати аналіз на ПЛР та на підставі отриманих результатів зробити висновок про наявність ВІЛ-інфекції в організмі. Максимальний період для початку діагностики імунодефіциту становить 8-9 місяців, а у виняткових випадках він продовжується до 2 років.
Для остаточної діагностики недуги дослідження проводять протягом року; через кожні 3 місяці пацієнт здає кров на ВІЛ. Негайне звернення до фахівця після небезпечного контакту знижує ймовірність зараження на 90%.
Для лабораторної діагностики раннього періоду хвороби використовують метод полімеразної реакції, що визначає нуклеїнові кислоти. Результати аналізу розшифровують протягом кількох годин при дотриманні повної анонімності.
Тест на ВІЛ/СНІД креатив МП-ВІЛ ½ проводиться в домашніх умовах через 4 тижні після небезпечного контакту. Тест-касети визначають антитіла до вірусу ВІЛ №1 та 2.
Немовлята, народжені від інфікованих матерів, піддаються процедурі виявлення вірусу СНІДу. Серологічні методи встановлення недуги не завжди підтверджуються у малюків віком 5-18 місяців, але результат має наступне позитивне значення в імуноблоті.
Високочутливий метод ПЛР дозволяє визначити наявність у організмі дитини вірусу СНІДу.
ДНК збудника виявляють у дитини першому місяці життя. Система визначення провірусу імунодефіциту варта встановлення концентрації РНК збудника.
Для аналізу придатна цільна кров або її сухі плями. Зразок поміщають у пробірку із консервантом ЕДТА у пропорції 1:20. Зберігають матеріал при температурі 2-8 ° C дві доби, виключивши заморожування крові.
Зразки сухої крові одержують методом нанесення цільної рідини на спеціальний папір. Матеріал для діагностики зберігають при температурі трохи більше 8 °C. Термін використання карток не перевищує 8 місяців.
Огляд новонародженого та взяття аналізу проводять у наступні терміни: через 2 доби після народження, у двомісячному віці, через 3-6 місяців. Виявлення гена провірусу ВІЛ через кілька годин після народження свідчить про інфікування плода у внутрішньоутробний період. Інфікування може статися під час пологів або при грудному вигодовуванні малюка.
Дані, що підтверджують наявність ДНК вірусу у двох контрольних зразках, вказують на розвиток ВІЛ-інфекції у малюка.
Диспансерне спостереження скасовують після отримання негативних тестів методом ПЛР через 4 місяці після народження дитини.
Хибнопозитивний аналіз на наявність вірусу імунодефіциту в крові пацієнта з багатьох причин спотворює точність визначення недуги. Помилки чатують на хворого при проведенні тесту в домашніх умовах.
Помилковий результат з'являється за наявності у пацієнта таких станів, як перехресна реакція, вагітність, донорів крові, інфікування вірусом грипу, захворювання дихальних шляхів, аутоімунних недугах, раку, склерозі.
Алергія сприяє виробленню антигенів, чужорідних організму пацієнта. Вони розпізнаються тест-системою з видачею хибного результату. Грибкова, вірусна інфекції сприяють неправильному визначенню наявності СНІДу.
Слід пролікувати інфекцію, та був проходити обстеження на СНІД. Для отримання якісного результату дослідження, пацієнт зобов'язаний розповісти лікареві про супутні недуги і лікування.
Загальний спектр антитіл, виявлених методом імуноферментного аналізу, у 95% осіб, заражених вірусом СНІДу. Позитивний подвійний результат ІФА передбачає наявність другого підтверджуючого етапу – тесту імуноблоту. Він складається з дослідження антитіл та їх співвідношення до індивідуальних білкових структур збудника. Дослідження ІФА має дві реакції: ферментативну та імунологічну. В основі аналізу знаходиться взаємодія антитіл та антигенів.
Послідовно визначають антитіла, імунний комплекс, активність ферменту. Фахівець проводить розшифрування даних аналізу. Негативні показники вказують на відсутність ВІЛ-інфекції у хворого.
За відсутності антитіл і недавньому зараженні лікар встановлює помилковонегативний результат.
При недбалому зберіганні зразків матеріалу вивчення вірусу отримані показники можуть бути хибними.
Тест, проведений після вакцинації пацієнта, дає позитивний результат і може бути достовірним.
Слід правильно готувати розведення сироваток, чищення використаних планшетів, набувати барвника високої якості.
Позитивний результат імуноболтингу проявляється при поєднанні смуг ГП 41 та ГП 120 та антигену. На негативний результат свідчить відсутність смуг.
При формуванні діагностичного висновку враховують результати тестів, показники обстеження хворого на стаціонарі, епідеміологічне опитування пацієнта.
Діагностика ВІЛ-інфекції необхідна для призначення ефективного лікування.Щоб діагностувати СНІД проводиться стандартна процедура обстеження пацієнта. Вона складається з 2 етапів:
Для встановлення діагнозу додатково призначають ПЛР, експрес-тестування.
Початкова діагностика СНІДу ґрунтується на застосуванні лабораторних білків ВІЛ, які вловлюють специфічні антитіла. Після контакту з ферментами тест-системи змінюється колір індикатора. Потім змінена кольорова гама обробляється за допомогою спеціальної апаратури, яка визначає результат тестування.
Подібна лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції показує результат через 21 день після інфікування. За допомогою ІФА не можна визначити наявність вірусу. Даний метод діагностики сприяє виявленню вироблення антитіл до вірусу. Подібний процес може спостерігатись через 2-6 тижнів після зараження.
Фахівці розрізняють 4 покоління ІФА-систем із різною чутливістю. Медики частіше застосовують тести 3 та 4 покоління. Ці системи створені на основі рекомбінантних білків або пептидів синтетичного походження, які мають значну точність і специфічність. ІФА застосовується для виявлення, моніторингу поширення вірусу, що забезпечує безпеку під час перевірки донорської крові. Точність таких систем коливається не більше 93-99%. Більшу чутливість мають тести, випущені в Західної Європи. Щоб виконати діагностику, лаборант проводить забір венозної крові (5 мл). За 8 годин перед дослідженням рекомендується відмовитися від їди. Дослідження найчастіше проводиться вранці.
Для отримання результатів тесту потрібно 10 днів. Якщо результат негативний, пацієнт не інфікований. У такому разі лікування не призначається. Хибнонегативний результат виявляється:
Якщо результат позитивний, пацієнт інфікований. У такому разі проводять ІБ. Неправдивий результат вказує на наявність супутніх захворювань та неправильно проведену підготовку крові. Якщо тестування показано вагітним, то у зібраному матеріалі лікар може виявити неспецифічні антитіла, вироблення яких не пов'язане з вірусом. Зібраний матеріал досліджується в референсі чи арбітражної лабораторії. Якщо результат повторного тестування негативний, тоді перший результат помилковий. У такому разі ІБ не проводиться.
Лікування СНІДу призначається при отриманні позитивного результату імунного блотингу. Цей метод діагностики проводиться за допомогою нітроцелюлозної смужки, яку наносяться вірусні білки. Для ІБ використовують венозну кров, яка потім піддається обробці. Білки, що знаходяться в сироватці, поділяються на групи з урахуванням їхнього заряду та молекулярної маси. Для такого процесу використовується спеціальна апаратура.
За наявності в досліджуваному матеріалі антитіл до вірусу на смужці проявляються відповідні лінії. Позитивне ІХ вказує на ВІЛ-інфікування пацієнта. Сумнівний результат виявляється на початкових етапах зараження, при туберкульозі та онкології, у вагітних. У разі рекомендується повторне проведення ІБ.
Невизначений результат ІХ вказує на наявність в імуноблоті одного та більше білків до вірусу. Подібна картина спостерігається при недавньому зараженні, коли в крові є незначна кількість антитіл до інфекції. У такому випадку ІБ буде позитивним через деякий час. Невизначений результат цього дослідження може бути пов'язаний з відсутністю ВІЛ-інфекції при гепатитах, хронічних обмінних захворюваннях у період вагітності. У такому разі ІХ стане негативним або фахівці виявлять у пацієнта причину невизначеного результату.
Захисна система уражається і натомість застосування вірусу в людський організм. Для інкубаційного періоду характерний термін 3 місяці. Тому після статевого контакту з ВІЛ-інфікованим партнером рекомендується пройти ПЛР-діагностику. Вона дозволить визначити РНК вірусу. Період, протягом якого рекомендується пройти подібне дослідження, становить 8-24 місяці.
Для остаточного діагнозу показано регулярне здавання крові на ВІЛ (1 раз на 3 місяці). За рахунок високої чутливості це обстеження дозволяє виявити вірус через 10 днів після інфікування. Несправжній позитивний результат при ПЛР можна отримати і за наявності в організмі пацієнта іншої інфекції. ПЛР дослідження вважається дорогою процедурою, оскільки потребує наявності спеціального обладнання.
ПЛР призначається для виявлення вірусу у наступних осіб:
Також дана методика показана для контролю концентрації вірусу в крові та дослідження донорської крові.
До сучасним методамдіагностики СНІДу спеціалісти відносять експрес-тести. Для їх розшифровки потрібно 10-15 хв. Імунохроматографічні тести, що базуються на капілярному потоці, забезпечують точні результати. Такі системи тестування представлені у вигляді спеціальних смужок, куди наноситься кров чи слина. За наявності вірусу через 10 хв на тесті з'являються 2 смужки:
У разі результат тестування носить позитивний характер. На негативний результат вказує на появу однієї контрольної смужки. Для підтвердження отриманого результату проводиться ІБ. На основі загальних даних лікар ставить діагноз, призначає лікування.
Можна виявити вірус у домашніх умовах. Для цього використовують спеціальні експрес-набори. OraSure Technologies1 – система, розроблена у США. Якщо після тестування виявлено позитивний результат, пацієнту рекомендується пройти повне обстеження у медичному центрі.
Новонароджені дітки, які народилися від інфікованих матерів, терміново піддаються обстеженню. За допомогою серологічних методик не можна точно виявити вірус у дітей віком 5-18 місяців. Але результат такого обстеження важливий під час проведення ІБ.
Виявити інфікування у дітей можна за допомогою ПЛР. ДНК вірусу виявляє фахівець у дітей першого місяця життя. Щоб встановити концентрацію РНК збудника, спеціалісти визначають провірус імунодефіциту. Для дослідження лікар використовує цільну кров або її суху пляму. Матеріал міститься в пробірку з консервантом ЕДТА (пропорція 1:20). Зразок необхідно зберігати за температури не вище 8°С (протягом 2 діб). Не допускається заморожування матеріалу.
Для отримання зразка сухої крові наносять цільну рідину на спеціальний папір. Зразок можна зберігати за температури нижче 8°С. Картки використовують протягом 8 місяців. Новонароджену дитину необхідно оглянути, взявши матеріал на дослідження, протягом наступних термінів:
Якщо лікар виявив ген провірусу ВІЛ через кілька годин після появи немовляти на світ, то сталося внутрішньоутробне інфікування малюка. Заразитися вірусом можна і під час пологів або при грудному вигодовуванні. Результати, що вказують на наявність ДНК вірусу у 2 зразках, вказують на розвиток СНІДу у дитини. Диспансерне спостереження не потрібне, якщо результати ПЛР негативні через 4 місяці після народження малюка.
Якщо результат тестування негативний, але симптоматика СНІДу є, тоді рекомендується проконсультуватися з лікарем. Подібна клініка може бути спровокована іншими захворюваннями. Єдиним і 100% методом діагностики вірусу вважається тестування. Навіть кваліфіковані і досвідчені фахівці не можуть визначити вірус за симптоматикою.
Якщо через деякий час результати пацієнта негативні, ВІЛ в організмі відсутня.
У цьому не враховується симптоматика. Але подібна клінічна картина може бути пов'язана із СНІДофобією. У такому разі потрібна допомога психолога. За потреби дитині або дорослому призначають відповідне лікування.
1. Серологічні методивиявлення антитіл (АТ) до ВІЛ - стандарт при діагностиці ВІЛ-інфекції (тест-системи ІФА на основі синтетичних пептидів - мають практично 100% чутливість і специфічність). ІФА дозволяє виявляти АГ ВІЛ, які можуть бути показниками раннього інфікування або навпаки пізнього – просунутого розвитку ВІЛ-інфекції (р24 АГ)
2. Підтверджуючі тести- імуноблотинг (ІБ), непряма імунофлюоресценція (НІФ) та радіоімунопреципітація (РІП).
а) ВООЗ рекомендує вважати позитивною сироватку, що має в ІБ антитіла до двох оболонкових білків і одного з внутрішніх білків ВІЛ. Пацієнти, позитивні в ІФА, але які мають невизначені результати в ІХ, повинні бути обстежені клінічно та оцінені іншими способами, медичним обстеженням, імунологічно та через 3 – 6 місяців їх сироватку крові необхідно тестувати на антитіла до ВІЛ.
б) метод непрямої імунофлюоресценції (НІФ) - застосовують як підтверджуючий тест у багатьох лабораторіях або як скринінговий тест.
в) радіоімунопреципітація - високочутливий та специфічний метод, заснований на використанні мічених радіоактивними ізотопами амінокислот. Метод високо чутливий для виявлення антитіл до поверхневих білків і тому є високоспецифічним, оскільки ці компоненти вірусу присутні практично у всіх ВІЛ-інфікованих після сероконверсії.
3. Молекулярно-біологічні методи: метод молекулярної гібридизації нуклеїнових кислот, ПЛР
1) як альтернативний та додатковий підтверджуючий метод детекції наявності вірусу в організмі по відношенню до серологічних методів лабораторної діагностики;
2) як перший метод специфічного аналізу при діагностиці раннього ВІЛ-інфікування, коли ще відсутні специфічні противірусні антитіла;
3) для діагностики ВІЛ-інфікованості новонароджених від ВІЛ-інфікованих матерів;
4) для визначення вірусного навантаження та призначення специфічної антиретровірусної терапії та контролю за її проведенням;
5) як уточнюючий метод при неясних серологічних результатах та при розбіжності серологічних та культуральних аналізів;
6) для дослідження сексуальних партнерів ВІЛ-інфікованих осіб;
7) як метод диференціальної діагностики ВІЛ-1 та ВІЛ-2;
4. Вірусологічний метод.
1. Принципи антиретровірусної терапії: лікування має починатися до розвитку суттєвого імунодефіциту; початкова терапія повинна включати комбінації не менше ніж із трьох препаратів; модифікація терапії повинна полягати у заміні або підключенні не менше двох нових препаратів; дуже важливо вимірювати рівень СД4+ клітин та вірусне навантаження; зниження вірусного навантаження рівня, що лежить нижче межі визначення чутливих методик, відбиває оптимальний ефект лікування.
2. Виділяють три групи сучасних антиретровірусних препаратів:
а) нуклеозидні інгібітори зворотної транскриптази (НДПТ):зидовудин (азидотімідин, ретровір); диданозин (ddI, відекс); зальцитабін (ddC, хівід); ставудин (зерит, d4Т); ламівудін (3ТС, епівір); абакавір; адефовір; комбівір (зидовудін + абакавір); тризивір (зидовудін + ламівудін + абакавір); адефовір (нуклеотидний інгібітори зворотної транскриптази).
б) ненуклеозидні інгібітори зворотної транскриптази (ННІОТ):справавердин (рескриптор); невірапін(вірамун); іфавіренц.
в) інгібітори протеази (ІП):саквінавір; ритонавір (норвір); індинавір (криксиван); нельфінавір (вірасепт); ампренавір (агенераза); лопінавір (алувіран); калетра (лопінавір + ритонавір).
3. Монотерапія будь-яким препаратом не може забезпечити достатньо вираженого та тривалого пригнічення реплікації ВІЛ. Більше того, при монотерапії підвищено ризик появи резистентних штамів та розвитку перехресної стійкості до препаратів тієї ж групи. Єдиним винятком є використання зидовудину як монотерапію для зниження ризику перинатальної передачі ВІЛ.
4. Найбільш важливим критерієм ефективності терапії є динаміка вірусного навантаження, яке слід визначати: без лікування – кожні 6-12 місяців, на фоні лікування – кожні 3-6 місяців, а також через 4-8 тижнів після початку противірусної терапії.
Крім антиретровірусної терапії необхідна терапія захворювань, що приєдналися вдруге.
34.3 СНІД (клінічні варіанти, опортуністичні захворювання).
Опутуністичні захворювання— тяжкі, прогресуючі хвороби, які розвиваються на тлі наростаючої імуносупресії і не зустрічаються у людини з імунною системою, що нормально функціонує (СНІД-індикаторні захворювання).
а) перша група— це захворювання, які властиві лише тяжкому імунодефіциту (рівень ЦД4+< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.
б) друга група- захворювання, які можуть розвинутися як на тлі тяжкого імунодефіциту, так і в ряді випадків без нього: 1. Бактеріальні інфекції, поєднані або рецидивні у дітей до 13 років (більше двох випадків за 2 роки спостереження): септицемія, пневмонія, менінгіт, ураження кісток або суглобів, абсцеси, обумовлені гемофільною паличкою, стрептококами. 2. Кокцидіомікоз дисемінований (нелегкова локалізація). 3. ВІЛ-енцефалопатія 4. Гістоплазмоз, дисемінований із позалегеневою локалізацією. 5. Ізоспороз з діареєю, що персистує понад 1 місяць. 6. Саркома Капоші у людей будь-якого віку. 7. В-клітинні лімфоми (за винятком хвороби Ходжкіна) або лімфоми невідомого імунофенотипу. 8. Туберкульоз позалегеневий. 9. Сальмонельозна септицемія рецидивна. 10. ВІЛ-дистрофія.
Найчастіше зустрічаються пневмоцистна пневмонія, криптококовий менінгоенцефаліт, генералізована цитомегаловірусна інфекція(енцефаліт, ретиніт, езофагіт, гепатит, коліт), сепсис змішаної етіології, генералізована форма саркоми Капоші, туберкульоз легень.
Всі ці захворювання протікають з ураженням одного або декількох органів і систем: головного мозку, легенів, печінки, шлунково-кишкового тракту і мають важкий прогресуючий характер. СНІД-індикаторні хвороби з'являються в різних поєднаннях, і навіть адекватна терапія не дає очікуваного ефекту.
Клінічні варіанти СНІД: інфекто-, нейро-, онко-СНІД залежно від переважання різної клініки.
Синдром набутого імунодефіциту вже протягом сорока років є однією з ключових проблем сучасного суспільства. Тому ВІЛ-діагностика зараз привертає багато уваги та ресурсів. Адже чим раніше буде виявлено вірус, що руйнує імунну систему організму, тим більш високими виявляться шанси уникнути смерті.
Під абревіатурою ВІЛ ховається визначення вірусу імунодефіциту людини — одного з найнебезпечніших серед існуючих. Під його впливом відбувається глибоке гноблення всіх захисних властивостей організму. Це, у свою чергу, призводить до виникнення різних злоякісних утворень та вторинних інфекцій.
Протікати ВІЛ-інфекція може по-різному. Іноді захворювання знищує людину за 3-4 роки, в деяких випадках може тривати більше 20 років. Цей вірус є нестійким і швидко гине, якщо знаходиться поза організмом носія.
ВІЛ може передаватися штучно, гемоконтактним шляхом та за допомогою біоконтактного механізму.
Якщо мав місце одиничний контакт із носієм вірусу, то ризик зараження буде низьким, але при постійній взаємодії він значно підвищується. Діагностика ВІЛ-інфекції - це те, чим не можна нехтувати, особливо при зміні статевого партнера
Звернути увагу варто і на парентеральний шлях зараження. Воно може статися під час гемотрансфузій зараженої крові, ін'єкцій з використанням голок, забруднених кров'ю ВІЛ-інфікованих, а також при нестерильних медичних маніпуляціях (татуювання, пірсинг, стоматологічні процедури з використанням інструментів, які не оброблені належним чином).
При цьому варто знати, що контактно-побутової передачі вірусу боятися не потрібно. Але факт залишається фактом: людина має високу сприйнятливість до ВІЛ-інфекції. І якщо заражається суб'єкт у віці за 35, то розвиток СНІДу відбувається значно швидше, ніж у тих, хто ще не подолав тридцятирічний рубіж.
Звичайно, кращий спосібідентифікувати проблему або її відсутність це діагностика ВІЛ-інфекції. Але які причини можуть бути у людини, яка веде здоровий спосіб життя, йти і перевіряти себе на факт зараження? Природно, що така ініціатива має бути чимось обґрунтованою. Тому важливо знати, які симптоми можуть свідчити про руйнівні процеси, що пригнічують імунну систему.
Стадію інкубації вірусу без аналізу крові виявити навряд чи вдасться, оскільки організм у цей час ще не реагує на ворожі елементи.
Друга стадія (первинні прояви) без допомоги лікаря може протікати непомітно. Але іноді відбувається активна реплікація вірусу, і організм на це починає реагувати – відзначається лихоманка, різні поліморфні висипи, лієнальний синдром та фарингіт. На другій стадії можливе приєднання таких вторинних захворювань, як герпес, грибкові інфекції, пневмонія та ін.
Для третьої, латентної стадії характерно поступове наростання імунодефіциту. Через те, що клітини захисної системи гинуть, динаміка їхнього виробництва підвищується, і це дозволяє компенсувати відчутні втрати. На цьому етапі кілька лімфатичних вузлів, що належать до різних систем, можуть запалитися. Але сильні болі при цьому не спостерігаються. У середньому латентний період триває від 6 до 7 років, але може затягтися на 20.
Під час стадії вторинних захворювань, яка є четвертою, з'являються супутні інфекції грибкового, бактеріального протозойного, вірусного генезу та злоякісні утворення. Усе це відбувається і натомість вираженого імунодефіциту.
Говорячи про глибоке пригнічення захисних механізмів організму внаслідок впливу вірусу, слід зазначити, що майбутнє пацієнта у разі безпосередньо залежить від своєчасної і точної діагностики.
Для цього в сучасній медицині використовуються різні тест-системи, в основі яких лежить імунохемілюмінесцентний, а також імуноферментний аналіз крові. Ці методики дозволяють визначити наявність антитіл, що належать різним класам. Такий результат допомагає відчутно збільшити інформативність методів аналітичної, клінічної специфічності та чутливості під час роботи з інфекційними захворюваннями.
Цікавим також є той факт, що саме метод полімеразної ланцюгової реакції дозволив вивести діагностику ВІЛ на новий рівень. Як матеріал для дослідження підходять різні біологічні матеріали: плазма крові, біоптат, зіскрібок, сироватка, спинномозкова або плевральна рідина.
Якщо говорити про методи лабораторних досліджень, вони передусім орієнтовані виявлення кількох ключових захворювань. Йдеться про ВІЛ-інфекцію, туберкульоз, всі інфекції, які передаються статевим шляхом, та вірусні гепатити.
Для ідентифікації вірусу імунодефіциту використовуються також молекулярно-генетичні та серологічні тести. У першому випадку визначається РНК вірусу та ДНК провірусу, у другому випадку проводиться аналіз антитіл до ВІЛ та виявляється антиген Р24.
У клініках, які застосовують, так би мовити, класичні способи діагностики, використовується переважно стандартний протокол серологічного тестування.
Цей вид визначення факту зараження необхідний у тому, щоб виявити загрозу ураження імунної системи якомога раніше. Це, по-перше, дозволяє уникнути поширення інфекції, по-друге, вплинути захворювання на початковій стадії.
Якщо розглядати приклад Росії, то в армії та на флоті РФ було введено клінічну класифікацію ВІЛ-інфекції. Це дало свої позитивні результати: процес ранньої клінічної діагностики став значно легшим.
Як поширені симптоми, що свідчать про можливе ураження імунної системи, можна визначити головний біль, нічну пітливість і невмотивовану стомлюваність. Можливий також розвиток лихоманки, що супроводжується ознаками тонзиліту. Це означає, що підвищується температура до 38 градусів і вище, і при цьому збільшуються піднебінні мигдалики, а також біль під час ковтання. Все це доповнюється швидкою втратою ваги. При цьому ці симптоми часто мають комплексний характер.
У деяких випадках ВІЛ-інфекція на ранніх стадіях може виявлятись у вигляді різних змін стану шкіри. Йдеться про плями, розеоли, гнійнички, фурункульози та ін. Рання ВІЛ-діагностика також включає роботу з такими симптомами, як генералізоване або обмежене збільшення периферичних лімфатичних вузлів.
Якщо спостерігається одночасне зростання кількох лімфовузлів, що триває протягом трьох місяців і більше, причому в різних групах, За винятком пахової області, тобто всі підстави підозрювати вірус імунної системи людини.
Говорячи про діагностику в пізніший період, слід звернути увагу на прояв вторинного імунодефіциту, який часто протікає під виглядом різних клінічних симптомів. Йдеться про такі прояви:
ВІЛ-діагностика на пізньому етапі включає обстеження при такому захворюванні, як саркома Капоші, що проявляється появою множинних новоутворень часто у верхній частині тіла у молодих людей з подальшим динамічним розвитком та метастазуванням.
Розглядаючи різні методи діагностики ВІЛ-інфекції, варто приділити окрему увагу. Відразу слід зазначити, що даний аналіз крові може бути спрямований на кількісну та якісну характеристику.
Як мета подібного способу виявлення вірусу можна визначити такі завдання:
Якщо говорити про первинне інфікування, слід зазначити, що подібна методика дозволяє визначити РНК ВІЛ у крові пацієнта після 14 днів з моменту зараження. Це дуже добрий результат. У цьому сам результат дослідження матиме якісне вираз: або позитивний (вірус присутній), або негативний.
Цей тип полімеразної ланцюгової реакції використовується для того, щоб визначити можливу швидкість розвитку СНІДу та скласти прогноз тривалості життя пацієнта.
Кількісне визначення клітин РНК ВІЛ у крові дає можливість зрозуміти, коли хвороба перейде у клінічну стадію.
Варто звернути увагу на той факт, що методи лабораторної діагностики ВІЛ дають точніший результат, якщо необхідний для аналізів біоматеріал визначається правильно, а його огорожа проводиться грамотно.
Щоб здійснювати якісний моніторинг інфікованих, необхідно (за наявності такої можливості) використовувати комплексний підхід до дослідження імунного статусу пацієнта. Йдеться про кількісне та функціональне визначення всіх ланок захисної системи: клітинний, гуморальний імунітет і неспецифічна резистентність як така.
Все частіше у сучасних лабораторних умовах використовується багатоетапний метод оцінки стану імунної системи. Така методика нерідко має на увазі визначення субпопуляції імуноглобулінів, лімфоцитів у крові. Це означає, що в облік береться співвідношення клітин CD4/CD8. Якщо результат показує менше 1,0, то є підстави підозрювати імунодефіцит.
Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції повинна включати цей тест в обов'язковому порядку, оскільки для цього вірусу характерна вибіркова поразка CD4-лімфоцитів, що призводить до помітного порушення згаданого вище співвідношення (менше 1,0).
Для оцінки імунологічного статусу медики можуть проводити тест щодо наявності «грубих» чи загальних дефектів у системі гуморального і клітинного ланки імунітету. Йдеться про гіпогаммаглобулінемію або гіпергаммаглобулінемію в термінальній стадії, а також зниження продукції цитокінів, підвищення концентрації циркулюючих імунних комплексів, послаблення відповіді з боку лімфоцитів на мітогени та антигени.
Варто звернути увагу і на той факт, що лабораторна діагностика ВІЛ має два ключові етапи:
У кінцевому підсумку такий алгоритм призводить до отримання позитивних, нейтральних чи негативних результатів.
Кожен громадянин повинен знати, що йому доступна діагностика ВІЛ. СНІД можуть ідентифікувати в установах приватної, муніципальної чи державної охорони здоров'я.
Природно, ідентифікація вірусу була мало корисна за відсутності різних методів на інфекцію. І хоча на даний момент ще немає вакцини, яка могла б повністю нейтралізувати вірус, грамотна діагностика, лікування ВІЛ та подальша профілактика здатні відчутно покращити стан хворого, продовживши цим життя. Ця теза підтверджує той факт, що середня тривалість життя чоловіків, які розпочали своєчасне лікування ВІЛ, становить 38 років. Жінки, які розпочали боротьбу з вірусом імунодефіциту, живуть у середньому 41 рік.
Після того, як було проведено діагностику, лікування ВІЛ зводиться до застосування кількох методик. Як одна з найпоширеніших можна визначити активну антиретровірусну терапію, вона ж ВААРТ. Якщо вчасно і грамотно застосувати цей вид лікування, можна значно уповільнити розвиток СНІДу або зовсім зупинити його.
Суть ВААРТ зводиться до того, що одночасно використовується кілька фармпрепаратів, які мають на меті вплив на різні механізми розвитку вірусу імунодефіциту.
Після того, як різні методи діагностики ВІЛ визначили факт зараження, можуть використовуватися ліки, які надають такі види впливу:
Важко переоцінити важливість таких заходів на хворобу, як діагностика, лікування, профілактика ВІЛ-інфекції. Тому найкраще, що можна зробити після позитивного результату дослідження щодо зараження, — це відразу почати боротися із хворобою. Як ще один метод, який допоможе це зробити, можна визначити вірусологічне лікування.
У цьому випадку йдеться про використання препаратів, які не дозволяють вірусу прикріпитися до Т-лімфоциту та потрапити всередину організму. Називаються такі препарати інгібіторами проникнення. В якості конкретного прикладуможна навести "Целзентрі".
Для придушення ВІЛ можна використовувати інгібітори вірусної протеази. Метою цієї групи ліків є запобігання зараженню нових лімфоцитів. Це такі препарати, як "Вірасепт", "Реатаз", "Калетра" та ін.
Третя група актуальних ліків – це інгібітори зворотної транскриптази. Вони необхідні для блокування ферменту, що дозволяє розмножуватися РНК вірусу в ядрі лімфоциту. Такі методи дозволяють відчутно вплинути таку проблему, як ВІЛ-інфекція. Діагностика, лікування та профілактика СНІДу — це справа кваліфікованих лікарів, тому алгоритм використання препаратів мають складати саме вони.
При необхідності може використовуватися також імунологічний та клінічний вплив.
Всесвітня організація охорони здоров'я пропонує такі методи боротьби з ВІЛ-інфекцією:
Для того щоб ВІЛ-діагностика не виявила наявність вірусу, слід дотримуватися простих правил безпеки:
Завдяки тому факту, що ВІЛ-діагностика не стоїть на місці, тисячі людей отримують можливість вчасно розпочати лікування та значно збільшити тривалість життя. Головне, не ігнорувати очевидні симптоми та не боятися йти до лікаря.
Обстеженню на ВІЛ-інфекцію підлягають:
2. Особи з підозрою або підтвердженим діагнозом: бактеріальної інфекції у дітей віком до 13 років, множинної та рецидивуючої; кандидозу стравоходу, трахеї, бронхів чи легень; цервікального інвазивного раку; дисемінованого або позалегеневого кокцидіомікозу; криптококозу позалегеневого; криптоспоридіоз з діареєю протягом 1 міс і більше; цитомегаловірусного ураження інших органів, крім печінки, селезінки, лімфатичних вузлів у хворих старше 1 місяця; цитомегаловірусного ретиніту із втратою зору; герпетичної інфекції, що викликає багатовогнищеві виразки, які не виліковуються протягом 1 місяця, або бронхіт, пневмонію, езофагіт; гістоплазмозу дисемінованого або позалегеневого; ізоспороза з діареєю понад 1 міс; туберкульозу поширеного чи позалегеневого; туберкульозу легень у дорослих або підлітків віком від 13 років; туберкульозу позалегеневого; іншого захворювання, викликаного мікобактеріями, крім М. tuberculosis дисемінованого або позалегеневого; пневмонії, спричиненої пневмоцистами; прогресуючої багатофокусної лейкоенцефалопатії; сальмонельозної (крім Salmonella typhi) септицемії, що рецидивує; токсоілаз-моза мозку у дітей старше 1 міс; саркоми Капоші; лімфоїдної інтерстиціальної пневмонії у дітей віком до 13 років; лімфоми Беркітта; імунобласної лімфоми; первинної лімфоми мозку; синдрому виснаження, гепатиту В, носія HBsAg; інфекційного мононуклеозу; рецидивуючого оперізувального герпесу в осіб старше 60 років; хвороб, що передаються статевим шляхом.
У високоспеціалізованій лабораторії проводяться:
а) визначення циркулюючих у крові антитіл, антигенів та імунних комплексів; культивування вірусу, виявлення його геномного матеріалу та ферментів;
б) оцінка функцій клітинної ланки імунної системи. Основна роль належить методам серологічної діагностики, спрямованим визначення антитіл, і навіть антигенів збудника у крові та інших біологічних рідинах організму.
Тестування на антитіла до ВІЛ здійснюють з метою:
а) безпеки гемотрансфузій та трансплантацій;
б) епіднагляду, тестування з метою моніторингу превалентності ВІЛ-інфекції та вивчення динаміки її поширеності у певній популяції;
в) діагностики ВІЛ-інфекції, тобто добровільне тестування сироватки крові практично здорових людей або хворих з різними клінічними ознаками та симптомами, подібними до ВІЛ-інфекції або СНІДу.
Система проведення лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції побудована за триетапним принципом. Перший етап – скринінговий, призначений для виконання первинних досліджень крові на наявність антитіл до білків ВІЛ. Другий референтний етап - дозволяє за допомогою спеціальних методичних прийомів уточнити (підтвердити) первинний позитивний результат, отриманий на скринінговому етапі. Третій етан – експертний, призначений для остаточної перевірки наявності та специфічності маркерів ВІЛ-інфекції, виявлених на попередніх етапах лабораторної діагностики. Необхідність кількох етапів лабораторної діагностики обумовлена передусім економічними міркуваннями.
У практиці застосовується кілька тестів, що дозволяють з достатньою мірою достовірності виявляти ВІЛ-інфікованих:
ІФА (ELISA)-тест (твердофазний імуноферментний аналіз) виявлення першого рівня, характеризується великою чутливістю, хоча і меншою специфічністю перед нижченаведеними;
Імунний блот (Western-blot), вельми специфічний тест, що найбільше використовується, що дозволяє диференціювати ВІЛ-1 і ВІЛ - 2;
Антигенемія р25-тест, ефективний у початкових стадіях зараження;
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).
У випадках масового скринінгу зразків крові рекомендується тестувати суміші сироваток від групи обстежуваних, складені з таким розрахунком, щоб кінцеве розведення кожного зразка не перевищувало 1:100. Якщо суміш сироваток виявляється позитивною, проводиться дослідження кожної сироватки позитивної суміші. Цей спосіб не веде до втрати чутливості як у ІФА, так і в імуноблоті, але знижує трудові витрати та вартість первинного обстеження на 60-80%.
При первинній серодіагностиці ВІЛ-інфекції проводиться визначення сумарних антитілза допомогою скринінгових відбірних тестів - ІФА та аглютинаційних реакцій. На другому (арбітражному) етапі використовують складніший тест - імуноблот, що дозволяє не тільки підтвердити або відхилити початковий висновок, але й зробити це на рівні визначення антитіл до індивідуальних білків вірусу.
Імуноферментний аналіз(ІФА) є основним та найбільш широко застосовуваним методом визначення антитіл до ВІЛ. Але до недоліків застосування ІФА в серодіагностиці ВІЛ-інфекції слід віднести часті хибнопозитивні результати. У зв'язку з цим результат ІФА не є підставою для висновку про ВІЛ-серопозитивність обстежуваного. Це пов'язано з недостатнім очищенням імуносорбенту від баластних білків; спонтанним зв'язуванням антитіл сироватки з пластиком, якщо його ділянки, які не зайняті імуносорбентом, недостатньо блоковані або не блоковані зовсім спеціальним нейтральним білком; перехресною взаємодією з ВІЛ-білками імуносорбенту різних протеїнів, присутніх у крові осіб з певними, найчастіше аутоімунними патологічними процесами типу розсіяного склерозу, ВКВ, туберкульозу; з частим донорством, інфекційними та онкозахворюваннями, опіками, вагітністю, повторними гемотрансфузіями, пересадкою органів, тканин, а також осіб, які перебувають на гемодіалізі; з присутністю в крові ревматоїдного фактора, що часто провокує ВІЛ-хибно-позитивні реакції; наявністю в крові обстежуваних людей антитіл до gag-білків ВІЛ і насамперед до білка р24 (очевидно, утворюються антитіла до екзо-або ендогенних ще не ідентифікованих ретровірусів). Оскільки анти-р24 синтезуються обов'язково на ранніх стадіях ВІЛ-сероконверсії, проводиться подальше імунологічне спостереження за особами з антитілами до gag-білків ВІЛ, а також усунення їх від донорства.
Чутливість та специфічність імуноферментного аналізу постійно підвищуються. У результаті ІФА четвертого покоління не поступаються своїм діагностичним можливостям імунного блотингу і можуть бути використані не тільки на скринінговому, але і на підтверджуючому етапі діагностики ВІЛ-інфекції [Смольська Т. Т., 1997].
Імуноблотингє кінцевим методом серологічної діагностики, що дозволяє зробити остаточний висновок про ВІЛ-позитивність або негативність обстежуваного.
Існує чітка кореляція між результатами дослідження сироваток в імуноблоті та ІФА - двічі позитивні в ІФА з різними тест-системами сироватки в 97-98% випадків виявляються потім ВІЛ-позитивними в імуноблотингу. Якщо сироватки виявилися позитивними в ІФА лише в одній з двох використаних тест-систем, в імуноблоті вони виявляються позитивними лише в 4% випадків. У 5% випадків під час проведення підтверджуючих досліджень в осіб із позитивними даними ІФА-імуноблот може давати «невизначені» результати, а серед них приблизно в 20% випадків «невизначені» результати викликають антитіла до gag-білків ВІЛ-1 (р55, р25, р18) ). Наявність антитіл тільки для gag-білків ВІЛ-1 є приводом для додаткового обстеження сироватки крові на інфікування ВІЛ-2.
Оцінка результатів імуноблотингу здійснюється строго відповідно до інструкції, що додається до тест-системи. У разі відсутності в інструкції вказівок щодо інтерпретації результатів слід використовувати критерії ВООЗ.
При отриманні позитивних результатів досліджень на референтному етапі лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції та негативному результаті дослідження методом імунного блотингу проводиться обов'язкова повторна експертна діагностика через 6 місяців після першого обстеження.
Якщо результати імуноблотингу через 12 місяців після дослідження першої проби залишаються негативними або невизначеними, то за відсутності факторів ризику, клінічних симптомів або інших факторів, пов'язаних з ВІЛ-інфікуванням, знімають обстежуваного з диспансерного спостереження.
Серед серологічних методів у разі невизначених результатів імуноблоту використовується як експертна діагностика радіоімунопреципітація(РІП). В її основі лежить використання білків вірусу, мічених радіоактивним йодом, а преципітати виявляються за допомогою бета-лічильників. До недоліків методу належить дорожнеча апаратури, необхідність устаткування цих цілей спеціальних приміщень.
Особи, у яких діагностовано ВІЛ-інфекцію, підлягають постійному динамічному спостереженню з обов'язковим лабораторним обстеженням кожні 6 місяців.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) виявляє попередньо помножені нуклеотидні послідовності, специфічні для геному даного збудника. Ізольоване множення гена або його фрагмента, зване ампліфікацією, ПЛР дає можливість здійснювати пробірку за допомогою ферменту термостабільної ДНК-полімерази. За 2-3 години ПЛР дозволяє отримати мільйони копій специфічної ділянки вірусу. При ВІЛ-інфекції з клітинної РНК, що включає і РНК вірусу, якщо він репродукувався в клітині або був інтегрований в її геном, за допомогою зворотної транскрипції та гібридизації з міченими олігонуклеотидними «зондами» отримують достатню для аналізу кількість провірусної ДНК, яку виявляють і характеризують , як і щодо приналежності до геному ВІЛ, за радіоактивною або іншою міткою зонда встановлюючи гомологію ДНК та специфічних для вірусу амінокислотних послідовностей. Чутливість ПЛР – виявлення вірусних генів в одній із п'яти тисяч клітин.
ПЛР, у тому числі кількісна, може бути використана тільки з метою визначення вірусного навантаження на плазму для вирішення питання початку медикаментозного лікування хворого або зміни антиретровірусних лікарських препаратів. ПЛР не може бути рекомендована для встановлення діагнозу ВІЛ-інфекції, оскільки навіть найсучасніші методи її постановки та реактиви дозволяють визначити вірусне навантаження не нижче певного рівня - 50 копій/мл. А складність постановки ПЛР та її дорожнеча (близько 200 доларів) зводять нанівець її широкомасштабне використання як методу повсякденної лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції. Таким чином, ПЛР залишається незамінною лише для оцінки вірусного навантаження на плазму у хворих із уже встановленим діагнозом ВІЛ-інфекції з метою вирішення питання терапії хворих.
Схематично етапи лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції подано на рис. 1.
Мал. 1. Етапи лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції
Протягом ВІЛ-інфекції існує період «темного лабораторного вікна», коли кількість антитіл проти ВІЛ недостатня для чутливості тест-систем. Цей період коливається від одного тижня до трьох місяців від моменту зараження ВІЛ залежно від рівня чутливості тест-системи. З огляду на це явища виникають складності при обстеженні донорської крові від осіб, які перебувають у згаданому періоді ВІЛ-інфікування. Тому в більшості країн світу введено систему використання крові тільки після її зберігання протягом 3-6 місяців з метою здійснення обов'язкового повторного обстеження на ВІЛ-інфекцію донорів даних доз крові та її компонентів.
p align="justify"> Стадія первинних проявів характеризується активністю реплікативного процесу. Вирімія, що виникають, і антигенемія викликають утворення специфічних антитіл класу IgM: анти-р24, анти-g41, анти-g120. Антиген р24 у частини інфікованих може бути виявлений у крові методом ІФА вже через 2 тижні після зараження і визначатися до 8-го тижня. Далі у клінічному перебігу ВІЛ-інфекції відзначається другий підйом вмісту у крові білка р24, він посідає період формування стадії СНІД.
Поява повної сероконверсії, коли в периферичній крові реєструється високий рівень специфічних антитіл класу IgG до структурних білків ВІЛ gp41, р24, gpl20, суттєво полегшує діагностику ВІЛ-інфекції. Більшість комерційних наборів розраховано на індикацію таких антитіл.
Труднощі з виявленням антитіл у хворих на ВІЛ-інфекцію можуть виникнути в періоди масивної віремії та антигенемії, коли наявні специфічні антитіла в крові витрачені на зв'язування вірусних частинок, і реплікативний процес випереджає напрацювання нових противірусних антитіл.
У осіб з початково ослабленою імунною системою віремія та антигенемія з'являються раніше і зберігаються на високому рівнідо результату захворювання. Водночас у таких хворих відзначається низький вміст вільних антитіл до ВІЛ, обумовлений двома причинами - недостатньою продукцією антитіл В-лімфоцитами та зв'язуванням антитілами віріонів та розчинних білків ВІЛ, тому для визначення інфікованості потрібні тест-системи з підвищеною чутливістю або модифікації методів аналізу, що передбачають етап вивільнення антитіл із імунних комплексів.
Незважаючи на велику кількість специфічних маркерів ВІЛ-інфекції, найчастіше визначальним є наявність сумарних антитіл до білків ВІЛ. Термін «сумарний» має на увазі присутність двох класів антитіл (IgG та IgM) та широкий спектр антитіл до різних, насамперед до структурних, білків ВІЛ.
Визначення CD4-клітин. Основним клініко-лабораторним показником діагностики стадії ВІЛ-інфекції, ступеня руйнування імунної системи у хворих на повсякденному життістало визначення вмісту CD4+-лімфоцитів: зменшення рівня нижче 200 клітин/мм3 є основним критерієм встановлення діагнозу СНІД. Вважається, що всі ВІЛ-інфіковані особи з кількістю CD4+-лімфоцитів 200 клітин/мм3 і нижче потребують як противірусної терапії, так і профілактики пневмоцистної пневмонії. І хоча у 1/3 ВІЛ-інфікованих з кількістю С04+-лімфоцитів менше 200 клітин/мм3 відсутні клінічні прояви, досвід показав, що у них симптоми розвиваються протягом 2 місяців, тому вони всі розцінюються як хворі на стадії СНІДу.
Як дізнатися, чи має людина ВІЛ? Найпоширеніший метод діагностики ВІЛ-інфекції – імуноферментний аналіз (ІФА). Імуноферментні тест-системи використовуються для виявлення у сироватці крові антитіл до ВІЛ.
ВІЛ-інфекція підтверджується двома різними тестами – скринінговим тестом та підтверджуючим тестом. Через високу чутливість скринінгові тести можуть давати хибнопозитивні результати. Тому зазвичай при отриманні первинного позитивного результату береться той же зразок крові і скринінговий тест дублюється вдруге, і якщо він знову позитивний, тільки тоді проводиться підтверджує тест іншого типу. Підтверджуючі тести проводяться лише зразків крові, які неодноразово дають позитивні результати (є «реактивними»).
Найбільш поширений скринінговий тест – імуноферментний аналіз (ІФА). Зазвичай йому використовують як підтверджуючого тесту імунний блотинг. Комбінація з двох різних типівтестів гарантує, що отримані результати мають «високу точність».
Скринінгові тест-системи використовують штучно створені білки ВІЛ, які ловлять специфічні антитіла, вироблені організмом у відповідь на білки вірусу. Як тільки антитіла спіймані, вони можуть бути визначені реагентами, які застосовуються разом з індикатором, наприклад, ферментом, який призводить до зміни кольору. Зміни кольору зчитуються машиною, яка визначає результат. Імунний блотинг діє за схожою схемою, але для нього використовується електричне поле, яке розрізняє різні компоненти на основі їхньої молекулярної маси. Це дозволяє визначити антитіла до специфічних вірусних антигенів, які потім зображуються на папері як помітні «смужки». Сучасні тест-системи можуть визначити ВІЛ-інфекцію через 3-5 тижнів у більшості людей.
Якщо був ризик зараження на ВІЛ, коли можна зробити тест?
Імуноферментний аналіз (ІФА), який використовується для діагностики ВІЛ, може показати результат лише за кілька тижнів після інфікування. Цей тип аналізу визначає не сам вірус, а антитіла щодо нього. У деяких людей антитіла присутні у крові в достатній кількості вже через 2 тижні. Тим не менш, у більшості людей освіта антитіл (сероконверсія) займає більше часу. Щоб результат тесту був достовірним, необхідно, щоб пройшло близько 3 місяців після ризикованої ситуації. Іноді утворення антитіл займає більше часу – від 3 до 6 місяців.
Якщо результат тесту є негативним через 3 місяці, чи обов'язково робити повторний тест через 6 місяців?
У переважної більшості людей тест цілком достовірний через 3 місяці (у більшості антитіл з'являються ще раніше). Можна повністю виключити можливість зараження, здавши аналіз через 6 місяців.
Як довго потрібно чекати на результати тесту?
Це від особливостей лабораторії, у якій проводитися тестування. Тест ІФА можна зробити протягом цього дня, але в більшості лабораторій цей термін може становити від 1-2 днів до 2 тижнів. Враховуючи, що очікування на результати може бути дуже неприємним періодом, найкраще уточнити це питання заздалегідь, до здачі аналізу. Також можна дізнатися, чи не вплинуть на термін тесту вихідні дні та святкові дні.
Наскільки достовірним є позитивний результат тесту?
Іноді у ІФА бувають хибнопозитивні результати (приблизно в 1% випадків), причиною подібного результату може бути вагітність, різні вірусні інфекції, а також проста випадковість. Після отримання позитивного результату необхідний точніший тест - імуноблот, за результатами якого і ставиться діагноз. Позитивний результат імуноблоту після позитивного ІФА достовірний на 99,9% – це максимальна точність будь-якого медичного тесту. Якщо імуноблот негативний, значить, перший тест був хибнопозитивним, і насправді ВІЛ у людини немає.
Що таке невизначений (сумнівний) результат?
Якщо ІФА буває позитивним чи негативним, то імуноблот може бути позитивним, негативним чи невизначеним. Невизначений результат иммуноблота, тобто. наявність в імуноблоті хоча б одного білка до вірусу може спостерігатися, якщо зараження відбулося нещодавно і в крові ще мало антитіл до ВІЛ, в цьому випадку імуноблот стане позитивним через деякий час. Також невизначений результат може з'явитися за відсутності ВІЛ-інфекції при гепатиті, деяких хронічних захворюваннях обмінного характеру або вагітності. У цьому випадку або імуноблот стане негативним, або буде виявлена причина невизначеного результату.
Чи потрібно при вступі на роботу складати тест на ВІЛ?
За законодавством РФ обов'язковим огляд на ВІЛ може лише для донорів крові, іноземних громадян, і осіб без громадянства, бажаючих в'їхати територію РФ терміном понад три місяці, а як і медичний персонал, що працює безпосередньо з кров'ю; особи, які перебувають у місцях позбавлення волі. Решта громадян здають тест на ВІЛ добровільно.
ВІЛ інфекція- Захворювання, що виникає в результаті зараження вірусом імунодефіциту людини (ВІЛ).
ВІЛ-це РНК-вірус, що відноситься до сімейства ретровірусів.
Загальною властивістю ретровірусів є наявність ферменту – зворотної транскриптази (ревертази), яка знімає з РНК генетично точну копію у вигляді ДНК. За морфологією, структурою геному та іншими ознаками ВІЛ належить до сімейства лентивірусів, тобто вірусів повільних інфекцій. До загальних рис захворювань, викликаних вірусами цього сімейства, можна віднести: тривалий період, що не має точних термінів, інкубації (від 1 міс. до 10 і більше років); непомітний, безсимптомний початок захворювання; повільно наростаючу клінічну картину; опосередкованість патогенезу через імунну систему та високу швидкість генетичної мінливості вірусу. Все це значно ускладнює діагностику, лікування та профілактику ВІЛ-інфекції.
В даний час відомі два різновиди ВІЛ: ВІЛ-1 та ВІЛ-2. Захворювання, що викликається ВІЛ-2, характеризується уповільненою динамікою та більш тривалим перебігом.
Епідеміологія та шляхи передачі:
ВІЛ-інфекція – антропоноз, єдине джерело збудника для людини – вірусоносій та хворий на СНІД.
Вірусні частки (віріони) – присутні у всіх біологічних рідинах організму, але у різних концентраціях. Найбільш високий вміст вірусу – у крові та насіннєвій рідині.
Передача вірусу здійснюється трьома шляхами:
- від матері до плода/новонародженого.
ВІЛ не передається при звичайних побутових контактах та повітряно-краплинним шляхом. Не зареєстровані й випадки передачі ВІЛ через укуси комах.
Однак контагіозність ВІЛ не така висока, як у інших ІПСШ. Так, із понад 1600 обстежених статевих партнерів ВІЛ-інфікованих лише 15% заразилися цим вірусом.
Розвиток ВІЛ-інфекції визначається двома взаємодіючими факторами: основною патогенною властивістю ВІЛ – послаблювати імунну систему інфікованої людини та специфічною імунною відповіддю організму, що розвивається у процесі захворювання.
ВІЛ пантропен, але основними клітинами-мішенями для нього є Т-хелпери, що несуть на мембрані сотні молекул CD4+ рецептора. В організмі вірус трансформується від менш агресивного стану в більш агресивному, що виявляється у прогресивному зменшенні числа CD4+ лімфоцитів у крові аж до повного їх зникнення та призводить до обтяження клінічної картини.
Від моменту інфікування до появи специфічних противірусних антитіл відбувається зазвичай 6-8 тижнів. Період між інфікуванням та появою визначених антитіл до ВІЛ у сироватці крові називається періодом «вікна».
З одного боку, імунна система є мішенню для вірусу, з іншого – сама виробляє специфічні антитіла щодо нього. При цьому в імунній системі відбувається розвиток аутоімунних процесів, які посилюють процес руйнування клітин та тканин організму.
ВІЛ-інфекція характеризується відсутністю специфічної клінічної картини, та її діагноз, як правило, ставиться на підставі ретельно зібраного анамнезу у поєднанні з низкою ознак, підтверджених лабораторною діагностикою. 1983 року ВООЗ розробила певні критерії, за якими можна встановити наявність ВІЛ-інфекції у разі недоступності серологічної діагностики (критерії «Банги»). До них відносяться:
- Втрата маси тіла більше, ніж на 10% від вихідної;
- хронічна діарея протягом більше одного місяця;
- Тривала лихоманка протягом одного місяця (постійна або інтермітує).
- Завзятий кашель більше одного місяця;
- Генералізований сверблячий дерматит;
- Herpes zoster в анамнезі;
- хронічна прогресуюча або дисемінована герпетична інфекція (herpes simplex);
Діагноз ВІЛ-інфекції за цими критеріями може бути поставлений хворому, якщо у нього виявляється одночаснопринаймні дві «великі» ознаки та одна «мала». Достатньою основою для постановки діагнозу СНІД може бути виявлення у хворого генералізованої саркоми Капоші або криптококового менінгіту. Через низьку чутливість та специфічність даних критеріїв ВООЗ надалі вимагала серологічного підтвердження діагнозу.
Клінічна класифікація ВІЛ-інфекції:
Стадія первинних проявів:
А. гостра гарячкова фаза;
Б. безсимптомна фаза;
В. персистуюча генералізована лімфаденопатія.
Стадія вторинних захворювань:
А. Втрата ваги менше 10 кг, поверхневі бактеріальні, вірусні, грибкові поразкишкіри та слизових, оперізуючий лишай, повторні фарингіти, синусити.
Б. Прогресуюча втрата у вазі більше 10 кг, незрозуміла діарея, лихоманка більше 1 місяця, волохата лейкоплакія, туберкульоз легень, повторні або стійкі бактеріальні, грибкові, вірусні, протозойні ураження внутрішніх органів(без дисемінації) або глибокі ураження шкіри та слизових, повторний та дисемінований оперізувальний лишай, локалізована саркома Капоші.
Наявність антитіл до ВІЛ у залежності від стадії захворювання.
Антитіла до ВІЛ у крові
Результат тесту на ВІЛ
ІІ. Первинні прояви
Б. Безсимптомна фаза
ІІІ. Вторинні захворювання
Після влучення вірусу в організм відбувається його розмноження в крові. У 50% інфікованих осіб у цей період може розвиватися продромальний стан, що супроводжується підйомом температури тіла до 38,5-39,5°С та іншими мононуклеозоподібними симптомами та зберігається від трьох до 10 днів. Такий стан минає, нагадуючи період відновлення після грипозної інфекції.
Починаючи з 6-8 тижнів захворювання, відбувається збільшення рівня антитіл у крові, тобто сероконверсія. У цей період може розвиватися генералізована лімфаденопатія та незначний імунодефіцит, але у частини хворих клінічні прояви ВІЛ-інфекції мінімальні. При вираженому синдромі набутого імунодефіциту людини (СНІД) відбувається бурхливий розвиток опортуністичних інфекцій внутрішніх органів, уражається нервова система. На шкірі та слизових спостерігається активізація сапрофітної флори. Розвивається саркома Капоші та інші пухлини. Можуть активізуватись такі інфекції, як туберкульоз, сифіліс, глибокі мікози та ін. Характерним захворюванням для ВІЛ-інфікованих є пневмоцистна пневмонія. У частини хворих збільшується печінка та селезінка, що є несприятливою ознакою, що свідчить про швидке прогресування процесу. Зустрічаються церебральні форми ВІЛ-інфекції – такі як менінгіти, викликані дріжджовими грибками, токсоплазматичні абсцеси мозку, гострі та підгострі енцефаліти, ізольовані пухлини мозку (лімфоми). У хворих можуть виявлятися різні судинні ураження.
До методів неспецифічної діагностики належать такі: визначення вмісту в крові субпопуляцій Т-лімфоцитів, оцінка активності реактивності Т-лімфоцитів периферичної крові чи біопсійного матеріалу.
До специфічних методів діагностики належать:
- Виявлення ДНК провірусу або РНК вірусу ВІЛ у клітинах людини методом ПЛР;
- Виявлення зрілих інфекційних віріонів у біологічних рідинах і клітинах;
- Визначення розчинних білків вірусу (антигенів);
- Визначення антитіл до ВІЛ (ІФА, імуноблот, реакція аглютинації, радіоімунопреципітація).
Найпоширеніший скринінговий метод діагностики – ІФА. Отримання негативного результату може свідчити:
- Про відсутність інфікованості;
- Про проведення дослідження до настання сероконверсії (у період «вікна» або в інші періоди зникнення титру антитіл).
Позитивні результати бувають істинними та хибними. Хибнопозитивні можуть бути отримані при обстеженні хворих на хронічні інфекційні, аутоімунні або онкологічні захворювання, неінфікованих вагітних жінок, пацієнтів після гемотрансфузій та хворих на хронічний алкоголізм. Найбільш ранні терміни виявлення антитіл до ВІЛ-3-4 тижні від дня зараження.
Який підтверджує аналіз. Імуноблот.
Після проведення скринінгового тесту всі позитивні результати перевіряються в іншій імуноферментній системі, а потім – у більш чутливому тесті – імуноблоті. Сироватки, підтверджені за допомогою цього тесту, можна вважати позитивними.
Перед проведенням дослідження на ВІЛ пацієнт обов'язково повинен бути проконсультований (дотестове консультування) на предмет причин, з яких необхідно провести аналіз, а після отримання результату, відповідно, необхідно провести післятестове консультування з метою роз'яснення результату дослідження. На всіх етапах діагностики та подальшого лікування необхідно дотримуватися конфіденційності.
Відомі чотири основні підходи до лікування ВІЛ-інфекції: етіологічний, імуностимулюючий, імунозамісний та патогенетичний (проти вторинних інфекцій).
Здатність пригнічувати зворотну транскриптазу вірусу мають аналоги нуклеотидів або інгібітори інших класів. Першим препаратом для лікування хворих на СНІД був аналог нуклеотидів – азидотимідин. Препарат викликає побічна дія, Впливаючи насамперед на гемопоез, і в більшості хворих при тривалому прийомі (більше 6 міс.) Формується стійкість до нього. В даний час використовують понад 10 нових препаратів – інгібіторів протеаз та зворотної транскриптази. Значно ускладнює процес створення ефективних препаратів швидка швидкість мутації ВІЛ в організмі, що супроводжується появою стійких до лікування штамів.
Тільки комбінований підхід може обмежити розмноження вірусу та запобігти розвитку лікарської стійкості. Стала стандартом потрійна антиретровірусна терапія (комбінація трьох лікарських препаратів, заснована на двох нуклеозидних аналогах та протеазоінгібіторах).
Сайт надає довідкову інформацію виключно для ознайомлення. Діагностику та лікування захворювань потрібно проходити під наглядом фахівця. Усі препарати мають протипоказання. Консультація фахівця є обов'язковою!
Дане вірусне захворювання було виявлено відносно нещодавно – у 80-ті роки минулого століття. Протягом 30 років цьому вірусу було приділено велику увагу. Було розроблено методи діагностики захворювання, постійно велося дослідження активності вірусу, були запропоновані схеми лікування. Однак про ефективному лікуваннізараз говорити рано. З відомих на сьогоднішній день методів лікування жоден не призводить до повного лікування захворювання. Адже над розробкою ефективної терапії працюють найкращі уми всіх розвинених країн.
СНІД – синдром набутого імунодефіциту. З розшифровки абревіатури зрозуміло, що це захворювання насамперед проявляється різким зниженням імунітету. Другим важливим ознакою і те, що це не вроджене, а набуте – тобто. імунітет людини знижується протягом життя, а не при народженні. Варто дати визначення ще одному поняттю – ВІЛінфекція. Отже, ВІЛ розшифровується як вірус імунодефіциту людини. У результаті дослідження цієї інфекції було встановлено низку специфічних ознак даного вірусу. При діагностиці цієї інфекції проводиться виявлення імунологічних ознак інфекції чи генетичного матеріалу вірусу.
Найбільш поширеними способом передачі ВІЛ-інфекції є передача через кров хворого або при статевому контакті. Через кров хворого
– даний спосіб передачі інфекції набув найбільшого поширення серед осіб, які страждають на наркоманію та використовують ін'єкційні наркотики. Найбільшою небезпекою є використання групою осіб одного шприца для ін'єкції наркотиків. Однак цей шлях передачі інфекції може бути здійснений і в результаті медичних втручань, стоматологічних маніпуляцій, переливання крові або трансплантації органу. Так само високу небезпеку дана інфекція є для процедурних медичних сестер або лікарів хірургів. Випадковий поріз чи укол у процесі медичних маніпуляцій може спричинити інфікування.
Статевий шлях інфікування
- цей шлях передачі інфекції нині найпоширеніший. При цьому ризик інфікування при різних видахстатевого акту відрізняється. При анальному контакті ризик інфікування у 15 – 45 разів вищий, ніж при генітальному. Важливе значеннятак само має цілісність слизових статевих шляхів, наявність хронічних інфекційно-запальних або венеричних захворюваньвражають слизову оболонку статевих органів.
Вертикальний шлях передачі (від матері до плоду). Цей вид інфікування спостерігається у 30% випадків. При цьому в 5 – 10% випадків передачі інфекції зараження відбувається внутрішньоутробно, у 15% випадків у процесі пологів, у 10% при грудному вигодовуванні. У зв'язку з цим ВІЛ позитивним матерям рекомендується перед вагітністю або в період вагітності провести противірусне лікування, розродження рекомендується методом кесаревого розтину, так само необхідно відмовитися від грудного вигодовуванняна користь штучного. Усі ці заходи призводять до значного зниження ризику інфікування дитини.
Відразу слід зазначити той факт, що специфічних симптомів ВІЛ-інфекції немає. Тому інформацію про симптоматику цього захворювання не варто зводити до рангу достовірної діагностики. Отже, перші ознаки ВІЛ інфікування можуть проявитися лише за кілька тижнів після інфікування. Як видно з перерахованих вище симптомів виявити за ними ВІЛ інфікування вкрай складно, тому що ці симптоми маскують ВІЛ під звичні для нас захворювання - ангіна, застудні захворювання, неврологічні порушення, захворювання шкіри. Також слід зазначити, що симптоматика ВІЛ інфекції може не проявлятися роками.
У клінічній картині даного захворювання важливим є перехід стану ВІЛ-інфікування в СНІД ( синдром імунодефіциту). На цьому етапі імунітет пацієнта знижений настільки, що будь-яка інфекція, яка у здорової людини навіть без лікування проходить безвісти, у хворого на СНІД може призвести до летального результату або до розвитку серйозних ускладнень. Для цієї стадії характерні пневмонії. нервової системи, грибкові ураження, цитомегаловірусна інфекція
Цінність лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції визначає неспецифічність клінічної картини захворювання. Однак своєчасність виявлення ВІЛ інфекції, до того моменту, як відбудеться еволюція в СНІД, є запорукою ефективності лікування з метою максимального продовження життя пацієнта за збереження якості життя. У ряді випадків ІФА може дати хибнонегативний або хибнопозитивний результат. Це може статися при несвоєчасному проведенні аналізу ( раніше 3-х тижнів після інфікування). Хибнопозитивний результат може мати місце при таких супутніх захворюваннях як онкологія, аутоімунні захворювання, хронічні інфекційні захворювання.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) – даний метод діагностики має високу чутливість, дозволяючи з високим ступенем достовірності визначити наявність ВІЛ інфекції. Однак цей метод найчастіше дає хибнопозитивні результати – причиною є його дуже висока чутливість. Засновано метод виявлення генетичного матеріалу вірусу. При цьому навіть кількох вірусних частинок достатньо для ідентифікації збудника.
1.
Запорука успішного лікування ВІЛ-інфекції полягає у своєчасній діагностиці. Для того щоб розпочати вчасне лікування та убезпечити близьких необхідно якомога раніше виявити захворювання. 2. ВІЛ-інфекція передається з кров'ю хворого, тому можливий лише гематогенний, статевий або вертикальний шлях передачі.
3.
Діагностика даного захворювання має бути комплексною – на підставі одного лише клінічного чи лабораторного обстеження виставити діагноз неможливо.
4.
При вагітності серед ВІЛ інфікованих жінок необхідне проведення комплексу заходів, спрямованих на запобігання інфікуванню плода.
Якщо виявити хворобу на ранній стадії і відразу приступити до її лікування, можна зупинити передачу вірусу від носіїв до здорових людей. Також раннє виявлення актуальне для надання соціальної, психологічної допомоги та можливості диспансерного лікування. На сьогоднішній день можливе лікування від цієї недуги, але за умови, коли діагностика ВІЛ інфекції виявила ранню стадію інфікування. Це суттєво продовжує життя хворим, що є для них важливо.
Є ряд симптомів, які повинні вас насторожити та змусити вирушити на обстеження:
Якщо у період діагностики матимуть місце прояви висипу, фурункульозу та інших проявів, це полегшить виявлення хвороби. Лімфаденопатія або збільшені лімфатичні вузли можуть говорити про можливу інфекцію, найчастіше це вузли шийні, щелепні, підключичні, пахвові та ліктьові. Розмір їх діаметром близько 2,5 см. При пальпації болючість не відчувається, вони щільного еластичного змісту, рідко проявляються як зливання до конгломерату. При ВІЛ вузли найчастіше збільшуються групами, строком на понад три місяці.
Нерідко при ранніх фазах хвороби зустрічаються психоневрологічні симптоми:
Ознаки початкової фази ВІЛ, куди слід звертати увагу:
Друга фаза недуги розгорнута списком суперінфекцій при імунодефіциті:
Остання фаза діагностування хвороби може включати:
Лабораторні методи– це виявлення СНІД-асоційованих відхилень у пацієнта, інфікованого другорядним імунодефіцитом. Хвороба ВІЛ містить 23 нозологічні види, доречний синдромальний підхід до визначення більш точного діагнозу.
Виявлення ВІЛ ґрунтується на встановленні антитіл до ВІЛ та вірусних антигенів, а в деяких випадках виявляється провірусна ДНК ВІЛ та вірусна РНК ВІЛ (у немовлят до 1 року). Основа виступає у трьох напрямах: визначення ВІЛ та її складових, виявлення анти-ВИЧ, встановлення змін у функціональності імунної системи. Складова ВІЛ- Це структурні гени gag, pol, а також env, саме вони кодують білкову трансляцію на базі безпосередньої будови вірусу.
Регуляторні гени- це об'єднання tat, rev, vif, nyf, vpx та vpr. Ген gag шифрує серцевинні білки з початковими продуктами трансляції, pр53 - попередній білок, який має властивість розщеплюватися на p15, p17 і p24 або р39 з наступним розщепленням на p17 і р24. У пацієнта виникають антитіла до акразке цього антигену, акр 24 можна виявити на початкових фазах інфікування, так як р24 імуногенніше, ніж р17.
