روش های پیگیری بافت شناسی بافت شناسی مدرن می تواند زرادخانه وسیعی از روش های مختلف بررسی داشته باشد. همه این روش ها را می توان برای zastosuvannya ضمیمه ویژه - یک میکروسکوپ، و به بوی بد تمام روش های میکروسکوپی استفاده می شود.
اگر سلول‌ها، بافت‌ها، اندام‌های زنده در حال رشد هستند و در کل ارگانیسم حرکت می‌کنند، و اگر اجسام مرده ثابت شوند، به دنبال هدف روش و اعمال آن به حیاتی (یا فوق حیاتی) خواهم بود.
توسعه روش پس از حیات، یا روش تهیه یک آماده سازی بافت شناسی پس از مرگ، موازی با پیشرفت علم بافت شناسی در نیمه دیگر قرن نوزدهم بود. یوگا را روش بافت شناسی کلاسیک می نامند. این روش، که تکنیک بافت شناسی یا میکروسکوپی نامیده می شود، به دستیابی به یک آماده سازی پیچیده از موضوع مطالعه کمک می کند. باقیمانده موضوع نگارش ویژه است تا کمک های بزرگی برای کمک های واجب به دست آورد. دانش آموزی که بافت شناسی را شروع می کند، برای درک بهتر آماده سازی و یادگیری تجزیه و تحلیل، "خواندن" باید با اصول اولیه تکنیک تهیه آماده سازی بافت شناسی آشنا باشد، زیرا جدیدترین آماده سازی های بافت شناسی به طور گسترده ای استفاده می شود. فرآیند اولیه علم، بنابراین.
اولین مرحله در تهیه آماده سازی، حذف مواد است. Vzhemu etapі، yak і vsіh پیشروی، به دنبال منحصر به فرد بودن آسیب اولیه جسم. به آن، virіzayuchi shmatochok ارگان چی پارچه، نیاز به گرفتن چاقو داغ chilezo، پارچه را با موچین فشار ندهید. قطعات در اندازه های کوچک گرفته می شوند - نزدیک به 1 سانتی متر مکعب (کوچکتر از 7x7x3 میلی متر). این ماده قابل سرزنش است، اما تازه، برای پذیرفتن آن به عنوان ضروری، مانند آن، پس از ذبح موجود آزمایشی یا مرگ یک فرد.
مرحله بعدی تثبیت مواد است، تثبیت نخ گرفته شده توسط مسیر قطعه گرفته شده. روش این مرحله تثبیت ساختارهای بافت شناسی و درشت مولکول ها در آن میدان است که جسم زنده در آن بو می دهد. بدیهی است که تثبیت کننده ها به تغییرات کمپ نشیمن سازه ها توجه دارند و همچنین می توان با انتخاب عوامل تثبیت کننده خاص، تغییرات را به حداقل رساند. الکل ها (اتیلوویوم، متیلوویوم)، فرمالین، نمک های فلزات مهم، اسیدها (اتسووا، پیکرینوا، اوسمیوا) به عنوان تثبیت کننده عمل می کنند. بیشتر اوقات، تاهای مختلفی از مبالغ ثابت وجود دارد که شامل نام اجزای spivings مختلف است.
مرحله سوم، معرفی مواد ثابت است. برای این ویکوریست از ارواح با غلظت های مختلف استفاده می شود که به تدریج از 50-70 به 100 درجه افزایش می یابد. Znevodnennya برای مرحله تهاجمی ضروری است - تقویت جسم، که در پارافین، سلوئیدین، رزین های مصنوعی یافت می شود. مهمتر این است که این نطق ها با آب مخلوط نشوند و برای اینکه مواد در آنها نفوذ کند باید آب را از پارچه خارج کرد و سپس زایلن (تولوئن، بنزن) را تراوش کرد، یعنی سخنرانی که برای پخش پارافین خوب است و همچنین درجه الکل آن حذف می شود. پس از تراوش جسم با پارافین کمیاب در دمای 55-56 درجه سانتیگراد، باید در دمای اتاق به همراه پارافین در فرم های مخصوص سفت شود. بنابراین بلوک پارافین را برنده شوید. این روش پر کردن نامیده می شود. در اسرع وقت می توان از طریق انجماد شماتوچکی در پارچه هایی با یخ خشک (دی اکسید زغال سنگ) یا نیتروژن کمیابساختار پروت اجسام بافت شناسی باقیمانده از گروه های مختلف گرفته شده است.
تقویت مواد اجازه می دهد تا یک دید نازک جدید (ضخامت 5-7 میکرون)، پیوتون (0.5-1 میکرون) که برای میکروسکوپ نوری، برای میکروسکوپ الکترونی، دید فوق نازک (0.05-0.2 میکرون) تزئین شده است. آماده سازی آزمایش ها بر روی دستگاه های ویژه - میکروتوم ها (برای میکروسکوپ نوری) و اولترا میکروتوم ها (برای میکروسکوپ الکترونی) انجام می شود. دید نازک، نازک یا بسیار نازک برای تبادل نور یا پرتو الکترونی توسط اجسام شفاف است و مشاهده آنها را با میکروسکوپ های مرئی امکان پذیر می کند. برای متمایز ساختن جزئیات ساختاری جسم، که بیشتر آنها با رنگ طبیعی قابل مقایسه نیستند، باید تیز (برای تصویربرداری در زیر میکروسکوپ نوری) یا کنتراست (برای میکروسکوپ الکترونی) انجام شود.
در بافت شناسی روش های زیادی برای تهیه فرآورده ها وجود دارد و انبارهای مختلف زیادی وجود دارد که به صورت تحقیقی آیش می شوند. انبارهای بافت شناسی برای سفرها به رزلین، پرورشی و مصنوعی (آنیلین) تقسیم می شوند. قنداق بارنیکی در حال رشد هماتوکسیلین است که از سرخک درخت لگ وود که در آمریکای مرکزی می روید و موجودی کارمین که از کوماخ - کوشانیلی تسخیر شده است گرفته می شود. اکثریت مطلق بارونیک ها مصنوعی هستند - ائوزین، فوشین، آزور توشچو.
مهم ترین طبقه بندی بارونیک های بافت شناسی برای مقامات شیمیایی, oskіlki در سری nіy ґruntuєtsya به درک که terminіv، yakі zustrіchatimutsya کشش دوره. بعداً برای قدرت شیمیایی بارونیکی های بافت شناسی، آنها را به اسیدی، بازی و خنثی تقسیم می کنند. قدرت های بارورهای اسیدی را گروه های -COOH، -HS03، H2P03 می نامند که به آنیون بارونیک می گویند. اسیدهای بارونیکی سیتوپلاسم سلول ها را زابارولیو می کنند که به آنها سیتوپلاسمی می گویند. لب به لب چنین انبارهایی می تواند ائوزین (بله، رنگ اریسیپلای روشن)، سبز روشن (بله) باشد. رنگ های سبز). ساختارهای بافت شناسی که با بارونیک ترش پر شده اند، اکسی دوست (اسیدوفیل، ائوزینوفیلیک) نامیده می شوند. به عنوان مثال، گرانول های سیتوپلاسمی لکوسیت های ائوزینوفیل، رشته های کلاژن و غیره.
ترکیبات بربر اصلی کاتیونی هستند، مهمتر از آن، اکثر آنها در انبار مولکول می توانند با اتم های نیتروژن بار مثبت داشته باشند. نام بارونیکی ویبیرکوو زابارولیویت هسته های کلیتین است و به همین دلیل آنها را هسته ای می نامند. لب به لب می تواند هماتوکسیلین (فاربوی در رنگ های آبی-بنفش)، کارمین (در رنگ مشکی روشن)، سافرانین (سیاه تیره)، لاجوردی II (به رنگ آبی) باشد. ساختارهای بافت شناسی که در انبار اصلی قرار دارند، بازوفیل نامیده می شوند. گرانول های Ce در سیتوپلاسم لکوسیت های بازوفیل، هسته سلول ها نازک هستند.
بارونیک های خنثی در انواع مختلف آب از بارونیک های اسیدی و بازی ایجاد می شوند، به عنوان مثال، ائوزین-اسید متیلن بلو. علاوه بر این، در صورت وجود همزمان بارونیک های پایه و ترش، در موارد زیر، بارونیک های خنثی تقسیم می شوند. سازه هایی که به طور همزمان ساختارهای بربر بازی و اسیدی را جذب می کنند، نوتروفیل یا پلی کروماتوفیل نامیده می شوند. Butt می‌تواند گرانول‌های لکوسیت‌های با پروفایل نوترو، سیتوپلاسم اریترو بلاست‌های پلی کروماتوفیلیک نیز باشد. کیفیت ساختارهای بافت شناسی و تغییر رنگ انبار اصلی با اصطلاح متاکرومازیا مشخص می شود. دانه بندی لکوسیت های بازوفیل، گفتار بین سلولی بافت غضروفی و غیره متاکروماتیک هستند. برخی از بارنیکی ها که بیشتر مورد استفاده قرار می گیرند، هماتوکسیلین و ائوزین هستند.
بارونیک‌های ترش، ساده و خنثی انواع خاصی را ایجاد می‌کنند که برای آشکار کردن سخنرانی‌ها یا ساختارهای آوازخوانی استفاده می‌شوند. به عنوان مثال، سودان III گفتار چاق را به رنگ های نارنجی تبدیل می کند و اورسئین - الیاف کشسان در طوفان ها.
فراورده‌های فربوانی مانند آب در الکل‌ها صدا می‌کنند، در زایلن می‌درخشند و با یک گلوله نازک بلسان کانادایی پر می‌شوند، با یک چین منحنی فر می‌شوند. پس از آویزان کردن به مومیایی، یک درمان دائمی به دست می آید که برای مدت طولانی قابل درمان است. برای میکروسکوپ الکترونی، بر روی اولترامیکروتوم‌ها، قرار داده شده بر روی غربال‌های مخصوص، در تضاد با نمک‌های اورانیوم یا سرب، از طریق میکروسکوپ نگاه کرده و عکس‌برداری می‌شود. ریز عکس های گرفته شده از هدف کشت یک ساعت از آماده سازی بافت شناسی.
توصیفات کریم از نماهای زیبا، و همچنین انواع دیگر آماده سازی های بافت شناسی، مانند ویکوریست، بسیار مشابه هستند، در حالت های دیگر کمتر. قبل از آنها، می توان اسمیر (خون، مغز استخوان، لجن، و غیره)، سواب (کبد، تیموس، غشای مخاطی سیچ میچور)، تف کردن (بافت موفق، جنب، صفاق، غشای نرم مغز)، کل آماده سازی (میکروب) را مشاهده کرد. ) مراحل اولیه rozvitku، stateevі kіtini).
روشهای حیاتی (زنده) پیگیری کلیتین یا بافت این فرصت را می‌دهد تا اطلاعاتی در مورد آنها، نحوه تجربه فرآیندهای زندگی، پروستژیتی روح، پودیل، رشد، وابستگی متقابل کلیتین و واکنش‌های آنها به فاکتور rіv به دست آوریم. روشهای پیگیری مقدماتی افزودنی ضروری به این داده‌ها هستند که با روش بافت‌شناسی کلاسیک در مورد زندگی روزمره، پارچه‌ها حذف می‌شوند. تحقیقات زنده باید در یک موجود زنده و سپس در داخل بدن انجام شود. برای پیگیری کلیتین‌های زنده از روشهای ویکوریستی برای زبارولنیا حیاتی و فوق حیاتی استفاده می‌شود. برای چه کسی انبارهای ویژه و غیر سمی برای بافت زنده کاشته شود. در صورت عفونت حیاتی، بارونیک باید به بدن موجود زنده وارد شود و vibirkovo zabarvlyu sevni klitini. بنابراین سیستم ماکروفاژ clitiny برای ذهن معرفی تریپان آبی یا لیتیوم کارمین را dosledzhuyut. Supravіtalne zabarvlennya - tse zabarvlennya زنده کلیتین، انزوا از بدن. این گونه است که لیزوزوم ها (بارونیک قرمز خنثی)، میتوکندری ها (سبزهای ژانوس)، رتیکولوسیت های خون (آبی الماس-کرسیل) نشان می دهند.
برای پیگیری حیاتی یا فوق حیاتی و همچنین پس از حیاتی اشیاء بافت شناسی غیرمقدار، تعدادی از روش های ویژه میکروسکوپ نوری استفاده می شود - کنتراست فاز، میدان تاریک، فلورسانس.
روش تغییر فاز کنتراست لازم ساختارهای غیر میله ای باقیمانده را در پشت پوسته یک دیافراگم حلقه مخصوص که در کندانسور قرار می گیرد و به اصطلاح صفحه فاز که در جسم قرار می گیرد را تضمین می کند. چنین طراحی اپتیک یک میکروسکوپ نوری اجازه می دهد تا تغییر فاز نور از جسم عبور کند، در دامنه، به عنوان یک تغییر در روشنایی چشم.
پایه ای اشیاء پیگیری - آماده سازی بافت شناسی و روش اصلی پیگیری معاینه میکروسکوپی است.
نمونه بافت شناسی را می توان با شفاف (نازک) و کنتراست درمان کرد. وین از ساختارهای زنده و مرده (ثابت) تهیه می شود. این دارو می تواند یک سوسپانسیون از کلتین، یک اسمیر، یک ویال، یک تف، یک آماده سازی کامل و یک رگه نازک باشد.
فرآیند تهیه آماده سازی بافت شناسی برای بررسی های میکروسکوپی شامل مراحل اصلی زیر است: 1) گرفتن مواد و تثبیت آن. 2) تقویت مواد؛ 3) تهیه دیدگاه ها. 4) farbuvannya، یا دیدگاه های متضاد. 5) چیدمان نماها.
برای farbuvannya، بشکه های بافت شناسی ویژه با مقادیر pH مختلف استفاده می شود: اسیدی، خنثی و بازی. ساختارهایی که توسط آنها بلعیده می شوند، بدیهی است که اکسی دوست، نوتروفیل (هتروفیل) و بازوفیلیک نامیده می شوند.
علم بافت شناسی با چه روش هایی تایید می شود؟ بوی تعفن برای تمام کردن اعداد و موارد مختلف:
میکروسکوپ نوری. میکروسکوپ مدرن ممکن است ساختمانی با دوز بالا داشته باشد. Razdіlna zdatnіst vyzachaetsya کمترین vіdstannya (د) بین دو نزدیک rozashovannymi نقطه، yakі شما می توانید bachiti okremo. Tsya vіdstan برای دراز کشیدن در vіd dozhina svіtlovoї khvili (λ) که با فرمول بیان می شود: d = 1/2 λ.
حداقل طول چروک قسمت قابل مشاهده در محدوده 0.4 میکرون است. همچنین اندازه میکروسکوپ نوری 0.2 میکرون می شود و کل افزایش آن به 2500 برابر می رسد.
میکروسکوپ فرابنفش . طول باد اشعه ماوراء بنفش 0.2 میکرومتر است، بعداً جداسازی میکروسکوپ فرابنفش 0.1 میکرومتر است، اما از آنجایی که نور ماوراء بنفش نامرئی است، بنابراین برای محافظت از جسم که مورد نیاز است، یک صفحه نورانی لازم است. .
میکروسکوپ فلورسنت (لومینسانس). ارتعاش Korotkohvilyove (نامرئی)، محو شدن در کنار سخنرانی ها، zbudzhuє їх الکترون ها، مانند ارتعاش نور با طول عمر بیشتر، به سمت قسمت مرئی طیف هجوم می آورند. در چنین رتبه ای، بر پیشرفت rozdіlnoї zdatnostі میکروسکوپ تأکید می شود.
میکروسکوپ کنتراست فاز به شما اجازه می دهد تا اشیاء بدون نوار را مشاهده کنید.
میکروسکوپ پلاریزاسیون توسعه معماری ساختارهای بافت شناسی، به عنوان مثال، فیبر کلاژن، در حال ایجاد است.
میکروسکوپ الکترونی امکان دیدن اجسام، zbіlshenі در ده ها هزار بار را می دهد.
میکروفوتوگرافی و میکروفتوگرافی . این روش ها امکان تثبیت اجسام بر روی عکس ها و اشیاء میکروسکوپی زنده در روسیه را فراهم می کند.
تاریخچه –آن سیتوشیمی از جمله kіlkіsna، اجازه می دهد تا تجزیه و تحلیل دقیق از همه اشیاء در سطح بافت، کلیتین و ساب کلیتین انجام شود.
سیتوسپکتروفتومتری امکان بافت kіlkіsny را به جای چی آرام و دیگر سخنرانی های بیولوژیکی در کلیتین ها و پارچه ها بر اساس رسم نور یک dozhina سرود در حالی که povyazanym توسط آنها انبار.
سانتریفیوژ دیفرانسیل به شما امکان می دهد در جای کلیتین که با توده خود در بین خود منفجر می شوند به اشتراک بگذارید.
رادیوگرافی این بر اساس گنجاندن یک برچسب رادیواکتیو (به عنوان مثال، ید رادیواکتیو، N- تیمیدین و در) در فرآیند تبادل است.
مورفومتری به شما این امکان را می دهد که مساحت و حجم سلول ها، هسته ها و اندامک های آنها را در پشت چشمی کمکی اشیا - میکرومترها و غربال های ویژه کنترل کنید.
Zastosuvannya EOM برای پردازش خودکار مواد دیجیتال
روش کشت بافتє podіlkoyu zhittєzdatnostі і podіlu kіtin i tkankin pose organіzmom. برای این ویکوریست ظروف مخصوصی با محیطی حیات بخش در نظر گرفته شده است که تمام ذهن های لازم برای زندگی کلیتین در آن ها ایجاد می شود. برای کمک به این روش، می توان تمایز و توسعه عملکردی کلیتین، منظم شدن تبدیل بدخیم آنها و ایجاد فرآیند چاق، تعامل بین سلولی، آسیب به کلیتین و بافت توسط ویروس ها و میکروارگانیسم ها را توسعه داد. آماده سازی های داروییدر فرآیندهای تبادل در کلیتین ها و بافت ها نیز.
Przhittєve (حیاتی) farbuvannya vikoristovuєtsya برای ظهور فاگوسیتوز و فعالیت ماکروفاژها، ظرفیت فیلتراسیون لوله های nirk و غیره.
روش پیوند بافت. این روش مبتنی بر روش پرورش رفتار کلیتین و حالت مورفوفنشنال آنها در هنگام پیوند آنها به ارگانیسم دیگر است. به عنوان مثال، این راه همراهی پیروزمندانه از زندگی موجودات، ضعیف تا یک دوز کشنده.
میکرو دستکاری.این روش مبتنی بر زیست‌شناسی مولکولی، مهندسی ژنتیک و همچنین در شبیه‌سازی است، اگر هسته سلول تخمک با مجموعه کروموزوم هاپلوئید با استفاده از یک میکرومانیپلاتور اضافی حذف شود و هسته سلول سوماتیک با مجموعه کروموزوم‌های دیپلوئید پیوند زده شود. به آن
موضوع بافت شناسی. روش های بررسی بافت شناسی نظریه کلیتین
مقدمه ای بر بافت شناسی. BUDOVA KLITINY.
سخنرانی 1
بافت شناسی- علم در مورد بودوا، توسعه آن زندگی ماده پارچه. بافت ها به سمت زنده ها و بی جان ها می پیچند. مطالعه اشیاء بافت شناسی، ساختارهای فوق نازک آنها با کمک میکروسکوپ انجام می شود که جزئیات را صدها هزار بار برای چشم ساده نامرئی می کند.
دوره بافت شناسی از نظر ذهنی به بخش های زیر تقسیم می شود:
1. سیتولوژی - علم کلیتین.
2. جنین شناسی - علم رشد، از ابتدا تا قالب گیری نهایی بدن.
3. بافت شناسی جهانی - علم الگوهای جهانی، قدرت در بافت ها.
4. بافت شناسی خصوصی - علم زندگی، توسعه اندام ها و سیستم ها.
وظیفه اصلی بافت شناسی به عنوان یک موضوع، حذف دانش در مورد سلول های زنده میکروسکوپی و اولترا میکروسکوپی، بافت اندام ها و سیستم های یک ارگانیسم سالم، در پیوند نامشخصی با رشد و عملکرد آنها است.
روش های اصلی بررسی بافت شناسی، میکروسکوپی و روش های خاص (غیر میکروسکوپی) (هیستوشیمی، سیتوفتومتری، اتورادیوگرافی و غیره) می باشد.
اشیاء پیگیری می توانند سلول ها و پارچه های زنده و مرده (ثابت) باشند.
برای کشت سلول ها و بافت ها در زیر میکروسکوپ، آماده سازی بافت شناسی تهیه می شود.
روش های اصلی برای بررسی اشیاء بافت شناسی، میکروسکوپ نوری و الکترونی است که به طور گسترده در عمل بالینی و تجربی استفاده می شود.
میکروسکوپ نوری نوری.بخش نوری اصلی میکروسکوپ توسط هدف چشمی تشکیل می شود. لنز قوی ترین سیستم نوری است که بزرگترین تصویر را از سوژه می دهد. چشمی یک سیستم نوری است که هنگام محافظت بصری از یک تصویر بزرگتر از یک شی که توسط عدسی داده می شود، به عنوان یک ذره بین عمل می کند. چشمی تصویر بزرگتر را 5-25 بار به صدا در می آورد.
بنابراین، مهم ترین ویژگی های یک میکروسکوپ، تنوع ساختمان و sbilshennia است. Razdіlna zdatnіst - حداقل vіdstаn بین دو نقطه از جسم، طوری که گویی می توانید همه چیز را ببینید. بزرگنمایی میکروسکوپ مقداری است که تفاوت بین ابعاد خطی تصویر را که توسط سیستم نوری میکروسکوپ قالب‌گیری شده است، بیشتر از ابعاد خطی جسم نشان می‌دهد. افزایش در میکروسکوپ باید به صورت افزایش شیئی و چشمی و تولید عددی پیشرفته تر این افزایش رسوب کند. میکروسکوپ نوری مدرن می تواند تا 1500 بار بین احیا کورین اندازه گیری کند.
میکروسکوپ الکترونیمیکروسکوپ الکترونی ممکن است دارای تنوع بالایی از ساختمان ها باشد. به عبارت دیگر، در میکروسکوپ الکترونی، از نظر تئوری، می توان تنوع جمعیت را افزایش داد و به طور کلی، با میکروسکوپ نورانی، تصویر را 150000 برابر افزایش داد. اغلب در مطالعات مورفولوژیکی میکروسکوپ الکترونیکی وجود دارد که نیمه شفاف هستند که امکان گرفتن ناحیه تصویر شی مورد بررسی را فراهم می کند. در بقیه سنگ ها، میکروسکوپ الکترونی شطرنجی (روبشی) به طور فعال اشغال می شود و تصاویر سه بعدی می سازد تا طیف وسیعی از تصاویر سازه ها را ثبت کند.
روش هایی برای تجزیه و تحلیل ریزساختارها در آماده سازی بافت شناسی و سیتولوژی Kіlkіsna otsіnka mikrostruktury є nebhіdnomu otrimannya ob'єktivnyh danih їkh stanov і normі، pri eksperimentalnymi vplіvі і pathologii. شاخص های اصلی ریزساختارها مورفومتریک (تعداد سازه ها و پارامترهای هندسی آنها) و تراکم سنجی هستند که غلظت را منعکس می کنند (تراکم نوری) سخنرانی های شیمیاییدر ریزساختارها برای تشخیص این پارامترها از روش های ریخت سنجی و اسپکتروفتومتری و همچنین سیستم های پردازش خودکار تصویر استفاده می شود.
تهیه آماده سازی بافت شناسی برای ارگانیسم بر روی بافت و کلیتین برابر برای تهیه آماده سازی بافت شناسی و مشاهده آنها در زیر میکروسکوپ ضروری است. فراآماده سازی آماده سازی بافت شناسی بر این اساس استوار است که با استفاده از روشی برای پردازش، مواد را به انتهای مرحله رساند که به راحتی در زیر میکروسکوپ قابل مشاهده است و ما می توانیم از طریق آن با کنتراست ببینیم. .
اغلب، این مواد در ظاهر تازه از مهم ترین ها پرورش می یابد (به عنوان مثال، مراقب کار اپیتلیوم چشمک زن باشید). برای آماده سازی، آماده سازی باید صرفاً بر اساس موضوع انجام شود. در وسط یوگو، یک قطره آب یا یک تفاوت فیزیولوژیکی قرار می‌گیرد، در یک یاک تکه‌های پارچه به هم می‌پیچد که به راحتی دیده می‌شود و تحت کنترل میکروسکوپ، آنها را با سوزن‌های کالبد شکافی صاف کنید.
به منظور ایجاد کنتراست بیشتر دارو و استفاده از فرصت برای تشخیص جزئیات دقیق تر، هدف تهیه دارو است. در همان زمان، آنها کوریست، ساختارهای مختلف پارچه و کلیتین واکنش متفاوتی به آن انبار کوچکتر نشان می دهند.
آماده سازی تدارکات سریع برای تکمیل ساعت پیروز بزرگ، چنین آمادگی هایی را می توان با یک دوره طولانی از سال های غنی انجام داد. آماده سازی از تعداد کمی از اشیاء (کل آماده سازی) یا بزرگ تهیه می شود. برای همه ذهن ها، جسم را می توان نازک و شفاف دید، در غیر این صورت نمی توان آن را زیر میکروسکوپ دید.
تهیه دارو از چند مرحله تشکیل شده است.
2. اشیاء بافت شناسی پیگیری
3. تهیه آماده سازی بافت شناسی
4. روش های پیگیری
5. مراحل تاریخی در توسعه بافت شناسی
1. بافت شناسیعلم در مورد حیات میکروسکوپی و زیر میکروسکوپی، رشد و زندگی موجودات بافتی موجودات. همچنین بافت شناسی در سازماندهی بافت زنده بافت یکی از برابرهاست. Razrіznyayut بنابراین ієrarchіchіchі rivniسازماندهی مواد زنده:
کلیتینیوم;
منسوجات؛
واحدهای ساختاری و عملکردی اندام ها؛
ریواس اندام;
سیستمیک ریون;
ریواس ارگانیک
بافت شناسی به عنوان یک رشته اولیهاز جمله بخش های تهاجمی: سیتولوژی، جنین شناسی، بافت شناسی عمومی (نشان دهنده حیات و عملکرد بافت ها)، بافت شناسی خصوصی (نشان دادن حیات میکروسکوپی اندام ها).
شی اصلیمطالعه بافت شناسی بدن یک فرد سالم است و اولین رشته ای که به آن داده می شود، بافت شناسی فرد نامیده می شود.
وظیفه اصلیبافت شناسی مبتنی بر جوانه ها، پارچه ها، اندام های پرورش یافته، ایجاد پیوند بین چیزهای مختلف، ایجاد الگوهای وحشی است.
بافت شناسی و همچنین آناتومی در علوم ریخت شناسی گنجانده شده است. مدیران ارشدتوسعه برخی از ساختارهای سیستم های زنده. از دیدگاه آناتومی، بافت شناسی ماده زنده حیات در سطح میکروسکوپی و الکترونی میکروسکوپی. در عین حال، تشکیل عناصر ساختاری مختلف در ساعت معین با بهبود عملکرد آنها انجام می شود. چنین پیشرفتی قبل از تشکیل ساختارهای ماده زنده هیستوفیزیولوژیک نامیده می شود و بافت شناسی اغلب نامیده می شود. هیستوفیزیولوژیعلاوه بر این، هنگام پیوند مواد زنده بر روی خطوط کلیتین، بافت و اندام، نه تنها می توان شکل، انبساط و شکل ساختارهایی را که نیاز به صیقل دادن دارند، مشاهده کرد، بلکه با روش سیتو هیستوشیمی، نشان دادن آن غیر معمول نیست. انبار سخنرانی هایی که این ساختارها را ایجاد می کند. نارشتی، ساختارهایی که صدا می‌پیچند، از رشد تکامل آنها، هم در دوره داخل رحمی (جنین) و هم به‌عنوان امتداد انتوژنز پس از جنین دیده می‌شوند. دلیل اصلی این امر نیاز به گنجاندن جنین شناسی قبل از دوره بافت شناسی است.
بافت شناسی، مانند یک علم، خودتان را بسازید اشیاء و روش هاїх vyvchennya. اشیاء غیر واسط تخمیر - سلول ها، قطعات بافت و اندام ها، یک روش ویژه برای آماده سازی vivchennya در زیر میکروسکوپ.
2. اشیاء به دنبالاشتراک گذاری در:
زنده (قطرات خون، کلیتینی در فرهنگ و غیره)؛
مرده یا ثابت است، بنابراین می توان آنها را از یک موجود زنده (بیوپسی) و همچنین از اجساد گرفت.
در هر صورت، پس از مصرف شاماتوچکیف، بوی تعفن به تعمیرات یا انجماد داده می شود. در اهداف علمی و اولیه، اشیا ثابت هستند. به روشی ساده تهیه می شود، آماده سازی هایی که برای شراب سازی توسط میکروسکوپ جانشین هستند، آماده سازی بافت شناسی نامیده می شوند.
آماده سازی بافت شناسیمی توانید نگاه کنید:
بافت نازک zabarvlennogo اندام چی;
لکه بر روی صورت؛
v_dbitka روی skli z اندام شکسته;
آماده سازی نازک plіvkovy.
آماده سازی بافت شناسی، چه به هر شکل باشد، در چنین علائمی مقصر است:
صرفه جویی در محل زندگی سازه ها؛
بوتی با یک نازک دوز می کند و ما می توانیم از طریق آن ببینیم تا در زیر میکروسکوپ نزدیک نور از آن عبور کند.
متضاد باشد، به طوری که ساختارهایی که جمع می شوند به وضوح زیر میکروسکوپ قابل مشاهده باشند.
آماده سازی برای میکروسکوپ نوری باید برای مدت طولانی و vikoristovuvatisya برای vinching مجدد ذخیره شود.
Qi vimogi رسیدن pіd ساعت آماده سازی دارو.
3. اینطوری ببین مراحل تهیه یک آماده سازی بافت شناسی
گرفتن مواد(بافت یا اندام Shmatochka) برای تهیه دارو. در هر زمان، از شروع لحظه محافظت می شود: جمع آوری مواد باید در اسرع وقت پس از مرگ انجام شود، یا در غیر این صورت به عنوان یک موجود، و اگر امکان دیدن یک جسم زنده وجود دارد (بیوپسی)، بنابراین که ساختار سلول، بافت یا اندام بهتر حفظ شود. parkan shmatochkіv مجرم است که با ابزار گوستری انجام شده است تا به پارچه آسیب نرساند. بالاتنه شماتوچکا در بازبینی مجدد 5 میلی متر مقصر نیست، به طوری که ثابت کردن روزچین فوراً به داخل تنه شماتوچکا نفوذ می کند. obov'yazkovo با علامت زدن shmatochka انجام شود (نام بدن مشخص شده است، شماره موجود یا نام شخص، تاریخ حصار نیز مشخص شده است).
تثبیت روی موادبرای حفظ فرآیندهای تبادل و حفظ ساختارها از پوسیدگی ضروری است. تثبیت را می توان در اکثر مواقع با zanurennyam shmatochka در تعمیر لباس به دست آورد، yakі می تواند الکل های ساده و فرمالین ها و گل رز Carnoy تا شده، فیکساتور Zinker و غیره باشد. فیکساتور باعث دناتوره شدن پروتئین می شود و در عین حال فرآیندهای تبادلی را تحریک می کند و ساختار را در مرحله زندگی فعلی حفظ می کند. همچنین می توان با انجماد (خنک کردن با جریان CO2، نیتروژن کمیاب و غیره) به تثبیت رسید. سه گانه تثبیت توسط آخرین مسیر بافت پوستی اندام انتخاب می شود.
پر کردن shmatochkiv در تنگه وسط(پارافین، سلوئیدین، رزین) یا انجماد برای آماده سازی بیشتر مقاطع نازک.
ادویه های آشپزیروی لوازم جانبی مخصوص (میکروتوم یا اولترامیکروت) برای کمک چاقوهای مخصوص. مناظر برای میکروسکوپ نوری به جسم چسبانده می شوند و برای میکروسکوپ الکترونی روی غربال های مخصوص نصب می شوند.
آلودگی مناظریا їхнє کنتراست (برای میکروسکوپ الکترونی). قبل از اینکه zabarvlennyam zrіzіv وسط باریک تری را ببیند (پارافین زدایی). تضاد ساختارهای موجود توسط zabarvlennyam به دست می آید. بارونیکی ها به پایه، ترش و خنثی تقسیم می شوند. به طور گسترده ای ویکورو بارونیک های اصلی (هماتوکسیلین صوتی) و اسیدی (ائوزین) هستند. اغلب بارونیک های تا شده وجود دارد.
روشنایی چشم(برای زایلن، تولوئن)، تخمگذار در رزین (مومیایی، پلی استرول)، پوشش با یک چین منحنی.
پس از انجام مراحل بعدی، آماده سازی را می توان در زیر میکروسکوپ نوری بررسی کرد.
برای اهداف میکروسکوپ الکترونیدر مراحل آماده سازی آماده سازی ها و ویژگی های خاص آنها، بلکه خود اصول کلی. نکته اصلی این است که آماده سازی بافت شناسی برای میکروسکوپ نوری می تواند مدت زیادی طول بکشد تا صرفه جویی کند و باگاتوراز vikoristovuvatisya. مناظر برای میکروسکوپ الکترونی یک بار تزیین می شوند. با کمک آن از جسم آماده سازی، که قرار است صدای جیر جیر بزند، عکس گرفته می شود و شکل گیری ساختارها قبلاً روی الکترونوگرام ها انجام می شود.
پارچه های W با قوام کمیابآماده سازی (خون، مغز استخوان و غیره) تهیه می شود و با مشاهده لکه روی سطح موضوع، آنها را نیز ثابت، پر می کنند و سپس می پیچند.
از اندام های پارانشیمی کوچک(جگر، نیرکا و غیره) آماده می شود و در بدن دیده می شود: بعد از شکستگی یا شکستگی عضو، تا زمان شکسته شدن عضو، شیئی را می زنند، بر روی یاک دانه هایی از گلبول های سفید می چسبانند. سپس دارو ثابت می شود، farbuyetsya و vivotsya.
زرشتوی، از اندام های فعال(بریزها، تونیک نرم) یا از یک بافت اسلوخنی فیبری کرکی، آماده سازی ساخته می شود و با کشش کشیده می شود، یا بین دو لیوان خرد می شود، همچنین با تثبیت تهاجمی، پر از رزین.
4. روش اصلی پیگیریاشیاء بیولوژیکی که در بافت شناسی پیروز هستند میکروسکوپ، یعنی تهیه آماده سازی بافت شناسی در زیر میکروسکوپ. میکروسکوپ می تواند یک روش مستقل تصویربرداری باشد، اما در بقیه روز از روش های دیگر (هیستوشیمی، هیستورادیوگرافی و غیره) استفاده کنید. به خاطر داشته باشید که برای میکروسکوپ طرح های مختلفی از میکروسکوپ ها وجود دارد که به شما امکان می دهد پارامترهای مختلف اجسام مورد استفاده را تغییر دهید. Razrіznyayut بنابراین میکروسکوپ را ببینید:
میکروسکوپ نوری (تراکم تقسیم شده 0.2 میکرومتر) بزرگترین نوع میکروسکوپ گشاد کننده.
میکروسکوپ فرابنفش (تراکم تقسیم شده 0.1 میکرومتر)؛
میکروسکوپ شب تاب (فلورسنت) برای شناسایی ویژگی های شیمیایی در ساختارهایی که در حال بررسی هستند.
میکروسکوپ فاز-کنتراست برای تجسم ساختارها در آماده‌سازی‌های بافت‌شناسی بدون نوار.
میکروسکوپ پلاریزاسیون برای حجاب، رتبه سر، ساختارهای فیبری.
میکروسکوپ در میدان تاریک برای شراب سازی اجسام زنده.
میکروسکوپ در نور در حال سقوط از دید اشیاء دیگر.
میکروسکوپ الکترونی (تقسیم شده تا 0.1-0.7 نانومتر)، دو نوع مختلف شفافیت (انتقال) میکروسکوپ الکترونی و روبشی یا میکروسکوپ روبشی سطح فراساختارها را نشان می دهد.
روشهای هیستوشیمیایی و سیتوشیمیاییبه شما امکان می دهد انباری از سخنرانی های شیمیایی را تعیین کنید و تعداد آنها را در سازه های مورد استفاده ایجاد کنید. روش پایه‌گذاری بر انجام واکنش‌های شیمیایی با معرف و گفتارهای شیمیایی که در بستر یافت می‌شوند، با محصول تایید شده واکنش (کنتراست یا فلورسنت) که سپس در میکروسکوپ نوری یا شب تاب استفاده می‌شود.
روش هیستو اتورادیوگرافیاجازه می دهد تا انباری از کلمات شیمیایی در ساختارها و شدت تبادل با گنجاندن ایزوتوپ های رادیواکتیو تا آخرین ساختارها آشکار شود. این روش در آزمایشات روی حیوانات پیروزترین است.
روش سانتریفیوژ دیفرانسیلبه شما این امکان را می دهد که اطراف اندامک ها را ببینید تا قطعاتی بسازید که از سلول ها دیده می شوند. برای این قطعه کوچک از اندام تمام شده، آن را مالش دهید، آن را با انواع فیزیولوژیکی پر کنید، و سپس آن را در یک سانتریفیوژ با پوشش های مختلف (از 2 تا 150 هزار) تقسیم کنید و کسری بردارید، که باید خرد شود، و سپس توسط مواد مختلف پیچانده شود. مواد و روش ها.
روش تداخل سنجیبه شما امکان می دهد از توده خشک سخنرانی ها در اشیاء ثابت چی زنده استفاده کنید.
روش های ایمونومورفولوژیکیکمک اضافی برای انجام واکنش های ایمنی از قبل، بر اساس تعامل آنتی ژن-آنتی بادی، تعیین زیرجمعیت های لنفوسیت ها، تعیین مراحل خارجی بودن سلول ها، انجام تایپ بافتی بافت های آن اندام ها (برای تعیین هیستوزوم) برای پیوند اعضا
روش کشت کلیتین(in vitro, in vivo) کشت سلول ها در نمونه ها یا در کپسول های مخصوص در بدن و کشت بیشتر سلول های زنده زیر میکروسکوپ.
مجردهای جهان که در بافت شناسی پیروز هستند
برای ساختارهای vimiryuvannya در میکروسکوپ نوری vikoristovuyutsya میکرومتری مهم: 1 میکرون می شود 0.001 میلی متر. در میکروسکوپ الکترونی، نانومتر ویکوریست: 1 نانومتر تبدیل به 0.001 میکرون می شود.
5. در تاریخچه توسعه بافت شناسیذهنی سه را ببینیددوره زمانی:
دوره Domikroskopichny(از قرن چهارم قبل از میلاد تا 1665 ص.) پوشش هایی با نام های ارسطو، جالینوس، آوسینی، وسالیوس، فالوپیا و با نمونه هایی از دیدن موجودات و انسان از بافت های ناهمگن (سخت، نرم، لاغر نادر) مشخص می شود. و روش های مختلف تهیه آناتومیک
دوره میکروسکوپی(از 1665 تا 1950). گوش آن دوره از نام فیزیکدان انگلیسی رابرت هوک گرفته شده است، که ابتدا، پس از تکمیل میکروسکوپ (آگاه باشید که اولین میکروسکوپ در گوش قرن هفدهم یافت شد)، تعدادی از اشیاء بیولوژیکی را منتشر کرد و نتایج این هشدارها در سال 1665 ص. در کتاب «میکروگرافی»، ثالثاً، اولین بار در اصطلاح «کلیتینا» (سلولیا). Nadal zdіysnyuvalos بدون وقفه به طور کامل میکروسکوپی و daedals گسترده تر از ویکتوریا їх vyvchennya بافت ها و اندام های بیولوژیکی.
برای عروسی روحانیون احترام خاصی قائل بود. یان پورکین، وجود "پروتوپلاسم" (سیتوپلاسم) و هسته ها را در موجودات کلیتین، و بعداً R. Brown، وجود هسته و در اکثر موجودات کلیتین را تایید کرد. M. Schleiden گیاه شناس در مورد سیتوکینز کلیتین نگران بود. نتایج این بررسی‌ها به تی شوان اجازه داد تا نظریه کلیتین (ص.
همه موجودات زنده و در حال رشد از سلول تشکیل شده اند.
همه سلول ها طبق اصل کلی از سیتوبلاستمی رشد می کنند.
کلیتینای پوست ممکن است نشاط مستقلی داشته باشد و سرزندگی بدن مجموع نشاط کلیتین است.
با این حال، R. Virkhov (1858) توضیح داد که توسعه کلیتین ها در امتداد مسیری در زیر کلیتین بیرونی ساخته شده است (خواه یک کلیتین از یک کلیتین). موقعیت Razroblenі T. Shvan، نظریه کلیتین مربوط به زمان ما است، اگرچه به طور متفاوتی فرموله شده است.
موقعیت فعلی نظریه کلیتین:
سلول کوچکترین واحد موجود زنده است.
موجودات clitiny موجودات مشابه خانواده خود هستند.
تولید مثل کلیتین در مسیر زیر کلیتین بیرونی.
ارگانیسم‌های کلیتین غنی مجموعه‌های جمع شونده کلیتین و سایر موارد مشابه هستند که در سیستم بافت‌ها و اندام‌ها متحد شده‌اند که توسط کلیتین، اشکال هومورال و عصبی به یکدیگر متصل می‌شوند.
دورتر، میکروسکوپ کامل، به ویژه ایجاد اجسام آکروماتیک، امکان آشکارسازی ساختارهای ظریف‌تری را در سلول‌ها فراهم کرد:
مرکز بالینی هرتویگ، 1875;
دستگاه جزئی یا مجموعه لایه ای گلژی، 1898;
میتوکندری بندا، 1898
مرحله مدرنتوسعه بافت شناسی در سال 1950 آغاز شد. روی بلال میکروسکوپ الکترونی برای نشان دادن اجسام بیولوژیکی استفاده شد، اگرچه میکروسکوپ الکترونی زودتر پیدا شده بود (E. Ruska, M. Knol, 1931). با این حال، برای مرحله مدرن توسعه بافت شناسی، معمول تر است که نه تنها از یک میکروسکوپ الکترونی استفاده شود، بلکه از روش های دیگر نیز استفاده شود: سیتولوژی هیستوشیمی، هیستورادیوگرافی و سایر روش های مدرن. در این مورد، مجموعه ای از روش های مختلف مورد نیاز است که به شما امکان می دهد نه تنها چند نشانه در مورد ساختارهای پیچ خورده را کنار هم قرار دهید، بلکه تعداد دقیق ویژگی ها را نیز در نظر بگیرید. روشهای مورفومتریک مختلف، سیستم‌های خودکار برای پردازش اطلاعات جمع‌آوری‌شده با رایانه‌های کمکی، به‌طور گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرند.
سخنرانی 2. سیتولوژی. سیتوپلاسم
اشیاء پیگیری می توانند سلول ها و بافت های ثابت (مرده) یا زنده باشند.
برای بهبود ریزساختار syrovina و محصولات ایجاد، به عنوان یک قاعده، تثبیت ویکتوری سلول ها و پارچه ها. آماده سازی timchasovymi، نشانه هایی برای vinification یک بار، اما آنها دائمی هستند، به عنوان شما می توانید ذخیره کنید و bagatorazovo dosledzhuvati. علاوه بر این، ویکوریست کل آماده سازی سلامت چی.
آماده سازی تیمچاسوفمی توانید سوپ گوشت خوک را بپزید. برای این منظور مواد را روی میکروتوم که منجمد است ثابت و قطع می کنند، با این نوردهی می توان با چاقوی جراحی یا چاقو برش نازکی از بافت یا اندام ایجاد کرد. ادویه ها را بردارید، آنها را روی شیب سوژه قرار دهید، سپس یک قطره گلیسیرین بمالید و آن را با شیب منحنی فر کنید. برای آشکار شدن نشاسته ویکوریست، ید را به یدید پتاسیم اضافه کنید: در مقدار کمی آب، 5/0 گرم یدید پتاسیم، 1 گرم ید کریستالی اضافه کنید و به 100 سانتی متر مربع آب اضافه کنید. روی یک تکه نازک کابوسی، آقا و مواد دیگر، که روی سطح موضوع پخش می شود، یک اسپرت معرف معرف بمالید، نشاسته به رنگ آبی-بنفش تبدیل می شود.
آماده سازی کامل یا پزشکیبدون از بین بردن بافت بدن ماندگار شود. به عنوان مثال، فشردن بافت سلولی subshkirnoy یا خرد کردن آماده سازی korintsya roslin پس از تثبیت، شستشو و farbuvannya بین موضوع و شیب منحنی قرار می گیرد. به منظور آشکار ساختن چهار عنصر ساختاری تثبیت و زبارولنیه میخک های بافت سلولی زیر جلدی یا بافت صاف میازوی، آنها را با پوست روی صورت موضوع کنده می کنند - چنین آماده سازی هایی را کندن می نامند. به روش های مختلفی، برای مثال، dosl_dzhuyuchi plivku sіtkіvki سیب تمام وقت یا shkіru pogolovka، پس از تعمیر و شستن zabarvlennya خجالت نکشید، زیرا در clitiny є گنجاندن آلی (پیگمنت)، scho ممکن است به طور طبیعی zabarvlennya باشد.
روش تهیه یک آماده سازی بافت شناسیروش اصلی تثبیت سلول ها و بافت ها بافت شناسی، توبتو است. پارچه doslіdzhennya zabarvlenogo zrіzu، در یک وسط خاص گذاشته شده است. برای از بین بردن جاذب، مواد تمام شده را داخل پارافین یا سلوئیدین بریزید، که به شما امکان می دهد لکه های نازک (5-7 میکرومتر یا 10-30 میکرومتر ضخامت) را اصلاح کنید، برای تهیه سریع ویسکوز (40-60 میکرومتر)، روش ویکوریست را فریز کنید. بنابراین.
مراحل اصلی در تهیه یک آماده سازی بافت شناسی: نمونه برداری، تثبیت، شستشو، انجماد، ریختن به پارافین یا کل، farbuvannya، تخمگذار در یک شیب منحنی.
انتخاب نمونه هابا بهبود meti doslіdzhennya و ساختار مواد انجام شود. نمونه رزماری مسئول میانگین 2.5-3.0 سانتی متر نیست. نمونه های کبد، طحال از کپسول گرفته می شود. از قلب می توان زواید دهلیزی را مشاهده کرد، پوسته های تونیک نازک تر، در پهلوها پایین تر است و در یک آماده سازی، دید توپوگرافی اپی کارد، میوکارد و اندوکارد را می توان انجام داد. سه برجستگی، گره های لنفاوی، برآمدگی های فوق عصبی حفره های اندام را نشان می دهند، جایی که زغال سنگ عمود بر سطح می رود، به طوری که قرنیه و قرنیه روی آماده سازی دیده می شود. در صورت نیاز به آماده سازی آماده سازی و تغییرات در اندام ها، قطعات مواد تکمیل شده باید در حلقه با حیاط آسیب دیده بررسی شود، به طوری که منطقه انتقال حفره توسط نمونه مصرف شود. از ماهیچه های اسکلتی، پروب باید به شکل زیر باشد، به طوری که الیاف m'yazovy در قسمت خلفی و عرضی باشد. گوشت چرخ کرده، آقا و سایر دانه هایی که لحیم شده را بشکنید، جلوی پارچه گاز قرار دهید و با نخ ببندید. اگر هنگامی که قفسه سینه خالی است، لگن های خاصیت ارتجاعی فروکش کرده و به طور قابل توجهی سبکی را از دست می دهند، سپس یک لیوان یا یک لوله لثه را داخل نای یا یک لوله هیومیک را از طریق یاک وارد کنید، دوباره به آرامی آن را تزریق کنید. یک بستن بخیه به نای زیر لوله وارد شده اعمال می شود. برای تثبیت روده ها، لیگاتورها را از هر دو طرف اندامی که برای تثبیت در جلو تعیین شده است، با بستن بانداژ کنید. نمونه ها با برچسب هایی از کاغذ کاغذی با شماره و تاریخ انتخاب نمونه ارائه می شوند.
تثبیت، tobto. حفاظت از معماری طبیعی (بکر) که با روش انتقال پروتوپلاسم زنده سازه ها از کمپ دائمی انجام می شود. اثر فیکساتورها در این واقعیت آشکار می شود که در بافت ها و اندام ها، پس از فرآیندهای بیوفیزیکی، انعقاد برگشت ناپذیر پروتئین ها رخ می دهد. از اندام گرفته می شود، یک تکه بافت معمولاً در فیکساتور zanuryuyut می شود. spіvvіdnoshnja obsyagu مواد و میله های ثابت ممکن است کمتر از 1:9 نباشد (شکل 3).
تثبیت برای ایجاد تا حد معینی آن تغییر در الزام علامت. متداول ترین برای تثبیت ویکوریست فرمالین 10-12٪، اتیل الکل، استون است. برای تهیه غلظت تجویز شده از ماده ثابت کننده، فرمالین 40٪ با آب لوله کشی رقیق می شود. اتیل الکل (100٪ مطلق، یا 96٪) در حالات آرام، اگر لازم است گفتار در چشم ظاهر شود، که در فیکساتورهای آب (به عنوان مثال، گلیکوژن) متفاوت است، zastosovuyut. در استون، مواد اضافی (به عنوان مثال، مغز سر) تنها چند سال ثابت می شود. اگر عضوی، به عنوان مثال، بافت کیستیک، از بین برود، کلسیفیکاسیون یا کلسیفیکاسیون انجام می شود. برای این کار، یک تکه کوچک از قلم مو (احتمالا آویزان شدن روی نخ) را در آب 5-8 درصد حذف کنید. اسید نیتریک، که برای دوبا 2-3 بار استخراج می شود. قضاوت در مورد نتیجه کلسیفیکاسیون، سوراخ کردن گردن نازک در برس: از آنجایی که پشتیبانی وجود ندارد - کلسیم زدایی تمام شده است. پس از چنین طرفداری
شستشوبرای حذف فیکساتور zayvoї kіlkostі انجام می شود، به عنوان مثال، پس از تثبیت با فرمالین، شستشو با آب جاری انجام می شود.
Znevodnennyaبرای تقویت مواد در اتیل الکل در حداکثر غلظت: 50-70-100. برای تهیه الکل 50 و 70 درصد الکل 96 درصد را با آب مقطر رقیق کنید. برای تهیه الکل 100% باید ویتریول آبی را تفت داده تا کاملا آب شود و اتیل الکل 96% را به پودر رنگ سفید اضافه کنید. در غلظت الکل پوست، بسته به اندازه شماتوچکف، اگر بدن، مواد را به مدت 1-24 سال برش دهید. در الکل 70 درصد، مواد را می توان با کشش kіlkoh dіb برش داد.
جاری شدن سیلتوسط چنین رسانه ای انجام شود، به طوری که انتهای رگه محکم شود، که به شما امکان می دهد بینش های ظریفی به دست آورید. برای این ویکوریست پارافین (نشت 1-4 سال)، کل (نشت سه سال). هنگامی که چربی آشکار شد، برای حفظ بافت ها و اندام های کرکی در ژلاتین ریخته می شود.
Zrіziبرنده شدن در سورتمه و میکروتوم های چرخشی. نازک ترین نماها (5-7 میکرون) باید از مواد تعبیه شده در پارافین تهیه شود. از مواد پر شده با سلوئیدین، یک شکاف 15-20 میکرونی تهیه کنید. برای دستیابی به ریزساختار syrovina و محصولات فرآیند طبیعی، به عنوان یک قاعده، از تکنیک انجماد جایگزین استفاده می شود. زودتر از آماده سازی آماده سازی، خرده ها در سه مرحله آبیاری و ریختن روشن می شوند. پس از تثبیت و شستن تکه های جسم، آن را روی میز شی ولولوژی میکروتوم قرار دهید که یخ می زند و دید با ضخامت 60-40 میکرون را از بین می برد. zrіzi را با پنزلیک نزدیک آب حمل کنید، بوی بد را صاف کنید، و به نازک ترین قلاب ها نگاه کنید.
Farbuvannya zrіzіvافزایش نسبت کنتراست ساختارهای مختلف در آماده سازی هایی که برای بررسی بیشتر توسط میکروسکوپ نوری شناسایی می شوند. در فرآیند دم کردن، فرآیندهای شیمیایی و فیزیکی پیچیده ای وجود دارد، بنابراین هنگام انتخاب یک روش، می توان بر سرزندگی ساختارهای کلینیتی به انبارهای آوازخوان با قدرت های فیزیکی و شیمیایی مختلف غلبه کرد.
بارونیک های اصلی (پایه)، ترش و خاص متمایز می شوند. سازه هایی که توسط بارونیک های اصلی پرورش داده می شوند نامیده می شوند بازوفیلیک،بارونیک ترش - اکسی دوست، اسیدوفیل، ائوزینوفیلیک.
برای حذف رنگ‌های سفید، آبی یا بنفش از هسته‌های اصلی (پایه‌ای) هماتوکسیلین ویکوریست، کروماتین فاربوی هسته و سایر ساختارها. کارمین که هسته یک رنگ قرمز روشن است، سافرانین یک فارب قرمز تیره، تیونین یک فارب آبی است.
از دانه های اسیدی، ائوزین (سیتوپلاسم zabarvlyuє به رنگ اریسیپل)، اسید پیکریک (رنگ زرد)، فوشین (رنگ سبز)، کارمین نیلی (رنگ آبی).
با بررسی ریزساختار syrovin و محصولات ایجاد شده، اغلب ترکیب هماتوکسیلین و ائوزین یافت می شود. برای اولین بار متوالی، هماتوکسیلین را از ریشه به مدت 1-3 دقیقه منتقل کنید. به مدت 20-30 دقیقه با آب بشویید، به مدت 3-5 دقیقه ائوزین را در ریشه قرار دهید و به مدت 3-5 دقیقه با آب بشویید. آب خارج شده با کاغذ صافی خارج می شود، یک قطره اتیل الکل 96٪ به مدت 1-2 دقیقه ریخته می شود و آب با اسید کربولیک 25٪ در زایلن یا تولوئن مخلوط می شود. سپس 1-2 قطره از مومیایی کردن را روی رگ ها بمالید و آنها را با شیب منحنی بپوشانید.
111. برای تهیه سایز بارونیک در الکل اتیلیک 95 سانتی متر 3 85 درصد، 5 سانتی متر مکعب به استون اضافه کنید و پودر سودان III را جرعه جرعه میل کنید تا مقدار غنی آن از بین برود (بارونیک مقصر کاهش زیاده روی است). Sumish تا 50% گرم شده و فیلتر می شود. Zrіzi که روی میکروتومی انجمادی برداشته می شود، به مدت 1-2 دقیقه در اتیل الکل 50٪ و سپس به مدت 25 دقیقه در سودان III قرار داده می شود. با الکل 50 درصد بشویید، با آب مقطر بشویید و با گلیسیرین-ژلاتین قرار دهید.
قطرات چربی خنثی به دلیل رنگ آمیزی سودان III در چربی ها به رنگ نارنجی در می آیند. شما همچنین می توانید اجزاء چربی را با اسید اسمیک حذف کنید، علاوه بر این، ساختارهای چربی به رنگ سیاه تبدیل می شوند.
ویسنووکدر وسط خرج کنند تا از باد و بنای طولانی برای حفظ روز غافل نشوند. Zabarvlenі zrіzi znevodnyuyut در الکل zrostayuchoї mіtsnostі і lay nіd krivne sklo در yalicovy، مومیایی کانادایی یا گلیسیرین-ژلاتین (دارو در چسبیدن به الکل و زایلول گناهی ندارد).
آماده سازی آماده سازی برای میکروسکوپ الکترونی.دو نوع میکروسکوپ الکترونی برای مطالعه اجسام بیولوژیکی وجود دارد: نیمه شفاف (انتقال دهنده) و روبشی (رستر).
اصل پردازش جسم برای بررسی بیشتر در یک میکروسکوپ الکترونی، که شفاف است، پایه‌ها در همان موقعیت‌های میکروسکوپ‌های نوری است: نمونه‌برداری، تثبیت، شستشو، هوادهی، ریختن، آماده‌سازی نماهای بسیار نازک، متضاد.
انتخاب نمونه هابا بهبود روش حفظ ساختار مواد، با تکمیل خود قوانین ساکت، برای میکروسکوپ نوری انجام شود. حجم قطعات مواد نهایی بیش از 1 میلی متر مکعب مقصر نیست. تثبیت متا سر - پارچه یاکوموگ را به کمپ زندگی نزدیکتر کنید.
تثبیتبرای حفظ کوتاه‌ترین زمان ساختارها، لازم است که واکنش‌پذیر باشد، scho ممکن است دارای pH و ایزوتونیک باشد که مقادیر آن بستگی به نوع پارچه ثابت دارد. فرآیند تثبیت در دو مرحله انجام می شود: پیشوند و پس تثبیت. برای پیش تثبیت، باید از محلول 2.5-3٪ گلوتاریک آلدئید (pH 7.2-7.4) استفاده شود، مدت تثبیت 2-4 سال است. پس فیکساسیون در 2% اختلاف (pH 7.2-7.4) - 1-2 سال موثر است. برای حفظ ساختار حیاتی، استفاده از تثبیت کننده در دمای پایین (0-4 درجه سانتیگراد) و تهیه فیکساتورها بر روی انواع بافر فسفات، کاکودیلات، ویرونال استات توصیه می شود.
شستشوبا 30% الکل سرد 5-7 بار انجام شود، قسمت پوستی الکل با جسم به مدت 30 دقیقه رگه می شود. اگر عمل اکسید کننده فیکسر متصل باشد تا حدی مانند یک فیکسر خواهم شد.
Znevodnennyaبا اتیل الکل های فرار فزاینده: 30، 50، 70، 96، 100٪ به مدت 30 دقیقه انجام دهید. با برخی از روشهای ریختن برای انجماد، توصیه می‌شود استون و پروپیلن اکسید را اضافه کنید.
جاری شدن سیلبرگزار شود رزین های اپوکسی(آرالدیت، ایپون تا در.). پلیمریزاسیون رزین ها در کپسول ها در یک ترموستات در دمای 60 درجه سانتیگراد تا سخت شدن انجام می شود، به طور معمول، با کشش 1-2 deb.
دید فوق العاده نازکبه کمک چاقوهای شیشه ای روی اولترامیکروتوم، که بلوک های اپوکسی به شکل یک هرم بریده شده با صورت چوتی تیز می شوند، برنده شوید. دید سریالی رنگ خاکستری باید در حمام با اتیل الکل 10٪ مشاهده شود. Otrimani zrіzi در وسط یا در طرفین پالادین ها نصب می شوند که روی سطح آن ها در قسمت جلویی قالب گیری از قالب اعمال می شود. برای آشکار ساختن ساختارهای بینایی لازم روی الک ها، سیترات سرب و اورانیل استات با روزت تصفیه می شوند.
برای میکروسکوپ الکترونی روبشی doslіdzhuvany zrazok رفع، znevodnyuyut آیش به نام doslіdzhennya، ویکوریست نشان داد فیکساتوری بالاتر. پس از آبیاری، ستاره را به جسم-تریماچ می‌چسبانند، در دستگاه اره قرار می‌دهند و با نازک‌ترین توپ طلا یا پلاتین می‌پوشانند. در نمای میکروسکوپ الکترونی، که نیمه شفاف است، برای اسکن، می توان آماده سازی خورنده را تشدید کرد: شیء عروسی با نوعی گفتار جامد پر می شود و سپس موج سواری و سطح آن نگاه می شود. آنها همچنین مانند یک روش انجماد - تراشه کردن، کپی بازی می کنند. به این ترتیب یک تراشه کوچک روی سطح جسم وجود دارد. به منظور افزایش کنتراست، ماکت ها باید در پشت اره اضافی ذرات فلزات (طلا، پلاتین) یا وگیل دیده شوند.
تغذیه را کنترل کنید
