روش های بررسی بافت شناسی بافت شناسی فعلی زرادخانه وسیعی از روش های مختلف بررسی دارد. همه این روش ها متکی به استفاده از یک دستگاه خاص - میکروسکوپ است و بنابراین همه آنها روش های میکروسکوپی هستند.
من با دقت شروع به بررسی شی مورد بررسی خواهم کرد، و این روش‌ها به حیاتی (یا فوق حیاتی) در صورت بررسی سلولها، بافت‌ها، اندام‌ها و کل موجودات زنده و پس از حیات، اگر نمونه‌های ثابت مرده در حال بررسی باشند، تقسیم می‌شوند. اشیاء.
توسعه روش پس از حیات، یا روش تهیه یک آماده سازی بافت شناسی دائمی، به موازات توسعه علم بافت شناسی در نیمه دیگر قرن نوزدهم رخ داد. به این روش بافت شناسی کلاسیک نیز گفته می شود. این روش که تکنیک بافت شناسی یا میکروسکوپی نامیده می شود، نیاز به آماده سازی کامل موضوع مورد بررسی دارد. برای رسیدن به مکلفین بزرگ، موضوع نوشتن خاص باقی می ماند. دانش‌آموزی که شروع به مطالعه بافت‌شناسی می‌کند باید با تکنیک‌های اولیه آماده‌سازی آماده‌سازی‌های بافت‌شناسی آشنا شود تا آماده‌سازی را بهتر درک کند و تجزیه و تحلیل، «خواندن» و حتی آخرین نمونه‌های بافت‌شناسی را بیاموزد. این داروها هم در ابتدا به طور گسترده استفاده می‌شوند. فرآیند و در تحقیقات علمی.
اولین مرحله در تهیه دارو، حذف مواد است. این مرحله مانند تمام حملات با پایان آخرین آسیب جسم دنبال می شود. بنابراین، هنگام برش دادن روی اندام یا بافت، باید از چاقو و تیغه های تیز استفاده کنید و پارچه را با موچین فشار ندهید. قطعات در اندازه های کوچک گرفته می شوند - حدود 1 سانتی متر مکعب (بیش از 7x7x3 میلی متر). مواد باید تازه باشد و باید در اسرع وقت پس از مرگ یک موجود آزمایشی یا مرگ یک فرد مصرف شود.
مرحله بعدی تثبیت مواد است که شامل سفت کردن بخیه گرفته شده و ثابت کردن لبه ها است. هدف از این مرحله تثبیت ساختارهای بافت شناسی و درشت مولکول ها در محلی که بو در جسم زنده وجود داشت است. اول از همه، فیکساتورها تغییرات در ساختارهای ایجاد شده را به حداقل می‌رسانند، یا می‌توانید مواد ثابت کننده خاصی را انتخاب کنید تا این تغییرات را به حداقل برسانید. تثبیت کننده ها عبارتند از الکل ها (اتیل، متیل)، مشتقات فرمالین، نمک های فلزی مهم و اسیدها (اکتوا، پیکرین، اسمیم). بیشتر اوقات، کیسه های ثابت تاشو مختلفی وجود دارد که شامل نام اجزای ترکیبات مختلف است.
مرحله سوم آبیاری مواد ثابت است. برای این منظور از الکل هایی با غلظت های مختلف استفاده می شود، به طوری که به تدریج از 50-70 به 100 درجه افزایش می یابد. ضد آب در مرحله بعدی ضروری است - یک جسم تقویت شده، که در پارافین، سلولز و رزین های مصنوعی یافت می شود. مهم این است که بیشتر این رزین ها با آب مخلوط نشوند و بنابراین برای نفوذ به مواد لازم است آب را با دقت از پارچه جدا کرده و سپس آن را با زایلن (تولوئن، بنزن) خیس کنید. یا رزین که پارافین را به خوبی تجزیه می کند و همچنین با اتیل الکل 100 درجه مخلوط می شود. پس از نفوذ پارافین کمیاب به جسم در دمای 5-55 درجه سانتیگراد، اجازه داده می شود تا در دمای اتاق به همراه پارافین در فرم های مخصوص سفت شود. نحوه کنترل بلوک پارافین به این صورت است. این روش پر کردن نامیده می شود. راه سریع تری برای منجمد کردن ضایعات پارچه با یخ خشک (دی اکسید کربن) یا نیتروژن کمیاب، ساختار اشیاء بافت شناسی مورد مطالعه در زمان های مختلف حفظ شده است.
مواد تقویت شده امکان تولید مقاطع نازک (ضخامت 5-7 میکرومتر)، نازک (0.5-1 میکرومتر) را فراهم می کند که می توانند برای میکروسکوپ نوری ویکوریزه شوند، و بسیار نازک برای دید میکروسکوپ الکترونی (0.05-0.2 میکرومتر) ویکتوره می شوند. آماده سازی مقاطع بر روی دستگاه های میکروتوم ویژه (برای میکروسکوپ نوری) و دستگاه های اولترامیکروتوم (برای میکروسکوپ الکترونی) انجام می شود. مقاطع نازک، نازک یا بسیار نازک برای تبادل نور یا پرتوهای الکترونی با اجسام شفاف هستند و امکان بررسی آنها را در زیر میکروسکوپ های درجه بالا فراهم می کنند. برای کالبد شکافی جزئیات ساختاری یک جسم که اکثر آنها دارای ابعاد طبیعی نیستند، باید از طریق نیاز به آماده سازی (برای تصویربرداری در زیر میکروسکوپ نوری) یا کنتراست (برای میکروسکوپ الکترونی) آنها را جدا کرد.
بافت شناسی روش های مختلفی برای تهیه آماده سازی و کمپوست سازی انواع زرشک های مختلف دارد که باید رعایت شود. از نظر بافت شناسی، زرشک به دو دسته وحشی، وحشی و مصنوعی (آنیلین) تقسیم می شود. میوه بارنبری هماتوکسیلین است که از پوست درخت لگ وود که در آمریکای مرکزی رشد می کند و ماده ای که در پشه ها - گربه ماهی - یافت می شود، استخراج می شود. اکثریت مطلق زرشک ها مصنوعی هستند - ائوزین، فوشین، لاجورد و غیره.
مهمترین چیز طبقه بندی زرشک های بافتی برای مقامات شیمیایی، بنابراین یک سری اصطلاحات در مورد آن وجود دارد که در طول دوره واضح تر می شود. بنابراین طبق نظر مراجع شیمیایی، زرشک های بافت شناسی به اسیدی، بازی و خنثی تقسیم می شوند. خواص زرشک ترش در گروه های -COOH، -HS03، H2P03 طبقه بندی می شود که به آنها زرشک آنیونی می گویند. زرشک اسیدی حاوی سیتوپلاسم سلولیت است که به آن سیتوپلاسمی می گویند. لبه چنین زرشک ها می تواند ائوزین باشد (رنگ زنگی روشن می دهد) ، سبز روشن ( می دهد رنگ سبز). ساختارهای بافت شناسی که با زغال اخته اسیدی تهیه می شوند، اکسی دوست (اسیدوفیل، ائوزینوفیلیک) نامیده می شوند. به عنوان مثال، اینها گرانول های سیتوپلاسمی لکوسیت های ائوزینوفیلیک، فیبرهای کلاژن و غیره هستند.
ترکیبات اصلی کاتیونی هستند، نکته مهم این است که اکثر آنها دارای مولکولی هستند که دارای بار مثبت با اتم های نیتروژن است. نام بارونیکوف به طور انتخابی هسته سلول ها را بارور می کند و بنابراین آنها را هسته ای می نامند. استوک می تواند هماتوکسیلین (فارب در رنگ آبی-بنفش)، کارمین (به رنگ قرمز روشن)، سافرانین (قرمز تیره)، لاجوردی II (به رنگ آبی) باشد. ساختارهای بافت شناسی تشکیل شده توسط بارناکل های اصلی بازوفیلیک نامیده می شوند. اینها گرانولهایی در سیتوپلاسم لکوسیتهای بازوفیل، هسته سلولها و غیره هستند.
زرشک های خنثی در حضور انواع آبی زرشک های اسیدی و بازی ایجاد می شوند، به عنوان مثال اسید ائوزینیک متیلن بلو. در ضمن زرشک های خنثی در صورت وجود زرشک های پایه و ترش همزمان باید جدا شوند. به ساختارهایی که حاوی زرشک های بازی و اسیدی هستند، دارای پروفیل خنثی یا پلی کروماتوفیل هستند. لب به لب می تواند گرانول های لکوسیت های با پروفایل نوترو، سیتوپلاسم اریتروبلاست های پلی کروماتوفیل و غیره باشد. وجود ساختارهای بافت شناسی که رنگ بارناکل اصلی را تغییر می دهند با اصطلاح متاکرومازیا مشخص می شود. دانه بندی لکوسیت های بازوفیل، بافت بین سلولی بافت غضروفی و غیره به صورت متاکروماتیک پوست می شود. یکی از پرمصرف ترین زرشک ها هماتوکسیلین و ائوزین است.
کرم های خاصی از زرشک ترش، پایه و خنثی وجود دارد که می توان از آنها برای شناسایی صداها یا ساختارهای آوازخوان استفاده کرد. به عنوان مثال، سودان III بافت های چربی را به رنگ نارنجی اضافه می کند و اورسئین الیاف الاستیک را به رنگ قهوه ای اضافه می کند.
آماده شده باید در الکل حل شود، در زایلول قابل مشاهده باشد، سپس یک توپ نازک از بلسان کانادایی بریزید و با یک لیوان منحنی بپوشانید. پس از خشک کردن مومیایی، یک داروی دائمی دریافت خواهید کرد که می توانید برای مدت طولانی از آن استفاده کنید. برای میکروسکوپ الکترونی، بخش‌هایی بر روی اولترا میکروتوم‌ها گرفته می‌شود، روی شبکه‌های ویژه قرار می‌گیرند، با نمک‌های اورانیوم یا سرب تضاد دارند، از طریق میکروسکوپ مشاهده می‌شوند و عکس‌برداری می‌شوند. میکروفتوگرافی ها از جسم خارج شدند و همزمان با آماده سازی بافت شناسی درمان شدند.
علاوه بر توصیف مقاطع نازک، انواع دیگری از آماده سازی بافت شناسی نیز وجود دارد که به طور قابل توجهی نادرتر هستند، به خصوص در موارد خاص. قبل از آنها اسمیر (خون، مایع مغزی نخاعی، مخاط و غیره)، اسمیر (کبد، تیموس، غشای مخاطی غشای چربی)، اسمیر (حاوی بافت، پلور، غشای مغز، غشای نزدیک بینی)، کل آماده سازی (برای زایمان) مراحل اولیهتوسعه، بیان).
روشهای حیاتی (بقا) برای ردیابی سلولها و پارچه‌ها این امکان را فراهم می‌کند که اطلاعاتی در مورد افرادی که تحت فرآیندهای زندگی قرار می‌گیرند، ردیابی سجاف، سجاف، رشد و تعامل بین پارچه‌ها، واکنش من به عوامل مختلف، به دست آید. روش های تعیین شده بررسی برای تکمیل این داده ها ضروری است که با روش بافت شناسی کلاسیک در مورد سلول ها و بافت های انسانی به دست آمده است. مطالعات Live-in در یک موجود زنده یا in vivo انجام می شود. برای نظارت بر سلول های زنده، از روش های vikoryst برای درمان حیاتی و اجرایی استفاده می شود. برای این منظور از زرشک های مخصوصی استفاده می شود که برای بافت های زنده سمی نیست. در صورت لقاح حیاتی، زرشک وارد بدن حیوان زنده می شود و سلول های سلولزی به طور انتخابی تخمیر می شوند. بنابراین، سلول های سیستم ماکروفاژ برای معرفی تریپان بلو یا لیتیوم کارمین نظارت می شوند. تخمیر فوق حیاتی تخمیر سلول های زنده جدا شده از بدن است. اینگونه است که لیزوزوم ها (بارونیک قرمز خنثی)، میتوکندری ها (سبز ژانوس) و رتیکولوسیت های خون (آبی الماس-کرسیل) آشکار می شوند.
برای بررسی حیاتی یا درون حیاتی و همچنین پس از حیات اشیاء بافت شناسی حفظ نشده، تعدادی از روش های ویژه میکروسکوپ نوری استفاده می شود - کنتراست فاز، میدان تاریک، فلورسانس.
روش انبساط فاز، کنتراست لازم را قبل از ردیابی ساختارهای غیرجذب در پشت قاب یک دیافراگم حلقه ویژه که در کندانسور و به اصطلاح صفحه فازی که در لنز قرار می گیرد، تضمین می کند. این طراحی از اپتیک میکروسکوپ نوری به شما امکان می دهد تغییرات فاز نوری را که از جسم عبور می کند، در دامنه ای که چشم را به عنوان تغییر در روشنایی مشخص می کند، معکوس کنید.
اصلی اشیاء تحقیق اینها آماده سازی بافت شناسی هستند و روش اصلی بررسی میکروسکوپی است.
نمونه بافت شناسی ممکن است شفاف (نازک) و متضاد به نظر برسد. شراب از هر دو ساختار زنده و مرده (ثابت) تهیه می شود. این دارو را می توان به عنوان سوسپانسیون بافت، اسمیر، مایع، مذاب، آماده سازی کل و یک بخش نازک استفاده کرد.
فرآیند تهیه آماده سازی بافت شناسی برای بررسی میکروسکوپی شامل مراحل اصلی زیر است: 1) گرفتن ماده و تثبیت آن. 2) مواد تقویت شده؛ 3) آماده سازی نمونه ها؛ 4) تهیه یا تضاد تصاویر. 5) قرار دادن چشم ها.
برای تهیه، از زرشک های بافت شناسی خاص با مقادیر pH مختلف استفاده می شود: اسیدی، خنثی و بازی. ساختارهایی که توسط آنها پردازش می شوند ظاهراً اکسی دوست، نوتروفیل (هتروفیل) و بازوفیل نامیده می شوند.
علم بافت شناسی از چه روش هایی استفاده می کند؟ بوی تعفن متعدد و متنوع است:
میکروسکوپ نوری. میکروسکوپ های امروزی داده هایی با وضوح بالا تولید می کنند. جدایی به عنوان کوچکترین فاصله (d) بین دو نقطه مجاور که می توان از هم جدا کرد تعریف می شود. این مقدار باید برای مدت طولانی در نور نگه داشته شود (λ) و با فرمول بیان می شود: d = 1/2 λ.
حداقل مقدار قسمت قابل مشاهده در محدوده 0.4 میکرومتر است. بنابراین حداکثر خروجی میکروسکوپ نوری 0.2 میکرون می شود و حداکثر ظرفیت به 2500 برابر می رسد.
میکروسکوپ فرابنفش . حداکثر مقدار اشعه ماوراء بنفش 0.2 میکرون است، اما قسمت مجزای میکروسکوپ فرابنفش 0.1 میکرون است و از آنجایی که اشعه ماوراء بنفش نامرئی است، لازم است از جسمی که تحت نظارت است محافظت شود.یک صفحه نمایش نورانی.
میکروسکوپ فلورسنت (لومینسانس). ارتعاش موج کوتاه (نامرئی) که در کنار رودخانه‌ها محو می‌شود، الکترون‌های آنها را بیدار می‌کند که با موج بزرگتر دوربرد به نور محو می‌شوند و در قسمت مرئی طیف باقی می‌مانند. به این ترتیب پیشرفت در قسمت های جداگانه میکروسکوپ جستجو می شود.
میکروسکوپ کنتراست فاز به شما امکان می دهد اشیاء ذخیره نشده را نمایش دهید.
میکروسکوپ پلاریزاسیون توسعه معماری ساختارهای بافت شناسی، به عنوان مثال، فیبر کلاژن، در حال مطالعه است.
میکروسکوپ الکترونی توانایی چرخاندن اجسام را می دهد و ده ها هزار بار افزایش می یابد.
میکروفوتوگرافی و میکروسینما . این روش ها به شما امکان می دهد از اشیاء در عکس ها و اشیاء میکروسکوپی زنده در روسیه عکس بگیرید.
تاریخچه –و سیتوشیمی از جمله kolkisna، امکان تجزیه و تحلیل واضح از اشیاء زیر را در سطوح بافتی، سلولی و درون سلولی فراهم می کند.
سیتوسپکتروفتومتری این امکان را فراهم می کند که به جای این مواد و سایر مواد بیولوژیکی، در پارچه ها و پارچه های بافته شده بر اساس کبوترهای رنگ روشن خاک رس با زغال اخته بافتنی بافته شود.
سانتریفیوژ دیفرانسیل به شما امکان می دهد سلول هایی را که با جرم خود از یکدیگر جدا شده اند جدا کنید.
رادیوگرافی این مبتنی بر گنجاندن یک ردیاب رادیواکتیو (به عنوان مثال، ید رادیواکتیو، N- تیمیدین، و غیره) در فرآیند تبادل است.
مورفومتری به شما امکان می دهد با استفاده از چشمی اضافی میکرومترها و شبکه های ویژه، مساحت و حجم سلول ها، هسته ها و اندام های آنها را اندازه گیری کنید.
Zastosuvannya EOM برای پردازش خودکار مواد دیجیتال
روش کشت بافتاز سرزندگی بدن و ساختار سلول ها و بافت ها پشتیبانی می کند. برای این منظور ظروف مخصوصی با محیط زنده ایجاد می شود که تمام مواد لازم برای حیات سلول ها در آنها ایجاد می شود. با استفاده از این روش می توان تمایز و شکل گیری عملکردی سلول ها، الگوهای انحطاط بدخیم آنها و توسعه فرآیند تورم، تعامل بین بین، سطح سلول ها و بافت ها توسط ویروس ها و میکروارگانیسم ها را مطالعه کرد. izmami, inflow. داروهای داروییدر فرآیندهای مبادله در مشتریان و بافت ها و غیره
Prizhitteve (vitalne) farbuvannya برای مطالعه تظاهرات فاگوسیتوز و فعالیت ماکروفاژها، فیلتراسیون کانال های عصبی و غیره استفاده می شود.
روش پیوند بافت. این روش مبتنی بر روش تغییر رفتار سلولها و حالت مورفوفنشنال آنها هنگام پیوند به ارگانیسم دیگر است. به عنوان مثال، از این روش برای حمایت از زندگی موجوداتی استفاده می شود که به اندازه کافی قوی هستند تا دوز کشنده دریافت کنند.
میکرو دستکاری.این روش مبتنی بر زیست‌شناسی مولکولی، مهندسی ژنتیک و همچنین در هنگام شبیه‌سازی است که با استفاده از یک میکرومانیپولاتور، هسته یک سلول تخمک با مجموعه‌ای از کروموزوم‌های هاپلوئید جدا شده و هسته یک سلول سوماتیک به آن پیوند زده می‌شود. مجموعه ای از کروموزوم های دیپلوئیدی
موضوع بافت شناسی. روش های بررسی بافت شناسی نظریه کلیتین.
مقدمه ای بر بافت شناسی. BUDOVA KLITINI.
سخنرانی 1
بافت شناسی- این علم حیات، رشد و حیات تار و پود ماده است. پارچه ها از بدن زنده و غیر زنده بافته می شوند. بررسی اشیاء بافت شناسی و ساختارهای ظریف آنها با کمک میکروسکوپ انجام می شود که جزئیاتی را که با چشم غیرمسلح قابل مشاهده نیست صدها هزار بار بزرگ می کند.
دوره بافت شناسی به صورت هوشمند به بخش های زیر تقسیم می شود:
1. سیتولوژی علم سلول است.
2. جنین شناسی علم رشد، از تولد تا تشکیل نهایی بدن است.
3. بافت شناسی مخفی علم الگوهای مخفی است که بر بافت ها حاکم است.
4. بافت شناسی خصوصی - علم بودوا، توسعه اندام ها و سیستم ها.
وظایف اصلی بافت شناسی به عنوان موضوع، کسب دانش در مورد بافت میکروسکوپی و اولترا میکروسکوپی، بافت اندام و سیستم های بدن سالم و ارتباط عصبی با رشد و عملکردهای ایجاد شده آنها است.
روش های اصلی بررسی بافت شناسی میکروسکوپی و روش های خاص (غیر میکروسکوپی) (هیستوشیمی، سیتوفتومتری، اتورادیوگرافی و ...) می باشد.
اشیاء مورد بررسی می توانند سلول ها و بافت های زنده یا مرده (ثابت) باشند.
برای بررسی سلول ها و بافت ها، آماده سازی بافت شناسی زیر میکروسکوپ تهیه می شود.
روش های اصلی برای بررسی اشیاء بافت شناسی، میکروسکوپ نوری و میکروسکوپ الکترونی است که به طور گسترده در عمل بالینی و تجربی استفاده می شود.
میکروسکوپ نوری نوریبخش نوری اصلی میکروسکوپ در لنز و چشمی تا می شود. لنز دارای قابل اعتمادترین سیستم نوری است که تصویر بزرگتری از سوژه ارائه می دهد. چشمی یک سیستم نوری است که به عنوان یک ذره بین عمل می کند در حالی که به صورت بصری تصویر بزرگتری از یک جسم ارائه شده توسط عدسی را می گیرد. چشمی تصاویر بزرگتر را در 5-25 بار تولید می کند.
بنابراین مهمترین ویژگی یک میکروسکوپ کارایی و بزرگنمایی آن است. جدایی - حداقل فاصله بین دو نقطه از جسم، همانطور که از بیرون قابل مشاهده است. بزرگ شدن میکروسکوپ مقداری است که نشان می دهد چند برابر ابعاد خطی تصویر تشکیل شده توسط سیستم نوری میکروسکوپ بزرگتر از ابعاد خطی جسم است. یک میکروسکوپ بزرگتر از یک لنز و چشمی بزرگتر بدست می آید و مقدار عددی بالاتری از اینها افزایش می یابد. میکروسکوپ های نوری امروزی تا 1500 برابر می باشد.
میکروسکوپ الکترونیمیکروسکوپ های الکترونیکی دارای تنوع بالایی هستند. به عبارت دیگر، در یک میکروسکوپ الکترونی، از نظر تئوری می توان داده های فردی را افزایش داد و ظاهراً تصویر را 150000 برابر بیشتر از میکروسکوپ نوری برابر افزایش داد. اغلب در تحقیقات مورفولوژیکی از میکروسکوپ های الکترونی استفاده می شود که به فرد امکان می دهد مساحت تصویر جسم مورد بررسی را اندازه گیری کند. در آینده، میکروسکوپ‌های الکترونی شطرنجی (اسکن‌کننده) به طور فعال برای ایجاد تصاویر بی‌اهمیت به منظور به دست آوردن فضای بیشتری برای ساختارهای تصویربرداری استفاده می‌شوند.
روش های بررسی کمی ریزساختارها در آماده سازی بافت شناسی و سیتولوژی ارزیابی کامل ریزساختارها یک شناسایی ذهنی ضروری از داده های عینی در مورد وضعیت آنها در شرایط عادی، در مطالعات تجربی و در آسیب شناسی است. شاخص های اصلی ریزساختارها مورفومتریک (تعداد سازه ها و پارامترهای هندسی آنها) و تراکم سنجی هستند که غلظت (قدرت نوری) را منعکس می کنند. سخنرانی های شیمیاییدر ریزساختارها برای شناسایی این پارامترها از روش های ریخت سنجی و اسپکتروفتومتری و همچنین سیستم های پردازش خودکار تصویر استفاده می شود.
اسکن ارگانیسم در سطح بافت و سلول نیاز به تهیه آماده سازی بافت شناسی و بررسی آنها در زیر میکروسکوپ دارد. روش تهیه یک آماده سازی بافت شناسی به این صورت است که مواد را برای بررسی زیر میکروسکوپ آماده می کنند تا شفافیت و کنتراست به دست آید.
اغلب، استفاده از مواد برای ظاهری تازه مؤثرترین است (به عنوان مثال، مراقبت از کار اپیتلیوم مهاجر). برای تهیه آماده سازی، یک شی تمیز بردارید. در وسط، یک قطره آب یا محلول فیزیولوژیکی قرار دهید، نمونه های پارچه را برای مشاهده آسان در آن بپیچید و با کنترل میکروسکوپ، آنها را با سرهای تشریح صاف کنید.
برای ایجاد تضاد بیشتر آماده سازی و کاهش توانایی جداسازی خوب از اطراف جزئیات، شی مورد آماده سازی قرار می گیرد. در عین حال، شایان ذکر است که ساختارهای مختلف بافت ها و سلول ها به طور متفاوتی به یکدیگر واکنش نشان می دهند.
آماده سازی آماده سازی دائمی می تواند زمان زیادی را ببرد و چنین آماده سازی ها را می توان در مدت زمان طولانی پردازش کرد. آماده سازی از اشیاء کامل کوچک (کل آماده سازی) یا بخش ها تهیه می شود. برای همه ذهن ها، شیء از طریق عدسی ظریف و روشن است، در غیر این صورت نمی توان آن را زیر میکروسکوپ بررسی کرد.
تهیه دارو شامل چندین مرحله است.
2. اشیاء بررسی بافت شناسی
3. تهیه آماده سازی بافت شناسی
4. روش های تحقیق
5. مراحل تاریخی در توسعه بافت شناسی
1. بافت شناسیعلم حیات میکروسکوپی و زیر میکروسکوپی، رشد و حیات بافت های موجودات زنده. همچنین بافت شناسی یکی از جنبه های اصلی سازماندهی بافت زنده است. اینها از هم جدا شده اند سلسله مراتبی برابر استسازماندهی مواد زنده:
کلیتینی;
منسوجات؛
واحدهای ساختاری و عملکردی اندام ها؛
ریواس اندام;
ریواس سیستم;
ریواس ارگانیک
بافت شناسی به عنوان یک رشته اولیه، شامل بخش های زیر است: سیتولوژی، جنین شناسی، بافت شناسی خارجی (شامل عملکردهای بیولوژیکی بافت ها)، بافت شناسی خصوصی (شامل بررسی میکروسکوپی اندام ها).
شی اصلیمطالعه بافت شناسی بدن یک فرد سالم است و بنابراین رشته اصلی را بافت شناسی انسان می نامند.
وظیفه اصلیبافت شناسی به سلول ها، بافت ها، اندام های زخمی، استقرار رباط ها بین اشیاء مختلف، ایجاد الگوهای پنهان اشاره دارد.
بافت شناسی، مانند آناتومی، به علوم ریخت شناسی گسترش می یابد، سر چرخانتغییرات مختلف در ساختار سیستم های زنده. بافت شناسی به جای آناتومی، مواد زنده را در سطح میکروسکوپی و میکروسکوپی الکترونی مطالعه می کند. در این حالت، اصلاح عناصر ساختاری مختلف در این زمان مطابق با عملکردهای تعیین شده به آنها انجام می شود. این رویکرد برای کاشت ساختارهای ماده زنده هیستوفیزیولوژیک نامیده می شود و بافت شناسی اغلب نامیده می شود. هیستوفیزیولوژیعلاوه بر این، با مواد زنده کاشته شده در سطوح سلولی، بافتی و اندام‌ها، نه تنها شکل، اندازه و توزیع ساختارها قابل مشاهده است، بلکه روش سیتوشیمی و هیستوشیمی اغلب تعیین می‌شود و نوع گفتار در آنها مشخص می‌شود. ساختارها ایجاد می کنند. ساختارهایی که رشد می کنند باید در رابطه با رشد آنها، هم در طول دوره داخل رحمی (جنین) و هم در طول انتوژنز پس از جنین بررسی شوند. این همچنین نیاز به گنجاندن جنین شناسی قبل از دوره بافت شناسی را توضیح می دهد.
بافت شناسی، به عنوان یک علم، خود را دارد اشیاء و روش هاخودشه. رایج ترین اشیایی که برای پیوند استفاده می شود، بافت ها، قطعات بافت و اندام ها هستند که به روشی خاص برای پیوند زیر میکروسکوپ آماده می شوند.
2. اشیاء تحقیقتقسیم می شوند:
زنده (کلین ها در قطرات خون، کلیتین ها در کشت و غیره)؛
مرده یا ثابت است که می تواند از یک موجود زنده (بیوپسی) یا از اجساد گرفته شود.
در هر صورت، پس از برداشتن تکه های کاغذ، بوی تعفن تسلیم هرگونه مشکل تعمیر یا یخ زدگی می شود. برای اهداف علمی و اساسی از اشیاء ثابت استفاده می شود. آماده سازی هایی که به این روش تهیه می شوند و سپس برای بررسی زیر میکروسکوپ تجزیه و تحلیل می شوند، آماده سازی های بافت شناسی نامیده می شوند.
نمونه بافت شناسیمیتوانی ببینی:
بافت اندام نازک و بسته؛
لکه بر روی پوست؛
تاثیر بر روی پوست اندام شکسته؛
آماده سازی تف نازک
آماده‌سازی بافت‌شناختی به هر شکلی مقصر عوارض زیر است:
حفظ عمر سازه ها؛
حتماً نازک و شفاف باشد تا در نوری که می گذرد زیر میکروسکوپ بررسی شود.
اگر متضاد باشد، ساختارهایی که تغییر می کنند به وضوح زیر میکروسکوپ قابل مشاهده هستند.
آماده سازی برای میکروسکوپ نوری باید برای مدت طولانی حفظ شود و دوباره استفاده شود.
اینها را می توان در عرض یک ساعت پس از تهیه دارو به دست آورد.
3. این را ببینید مراحل آماده سازی آماده سازی بافت شناسی
مواد را بردارید(یک تکه بافت یا اندام) برای تهیه دارو. در این صورت جمع آوری مواد باید قبل از مرگ یا مرگ حیوان و در صورت امکان به صورت جسم زنده (بیوپسی) انجام شود تا ساختارهای بدن، بافت یا اندام بهتر حفظ شود. ; دوخت دوخت باید با استفاده از یک ابزار استاندارد انجام شود تا به پارچه آسیبی نرسد. پارچه مورد نیازی به 5 میلی متر زیاد کردن ندارد تا علامت تثبیت بتواند در پارچه آن نفوذ کند. اقلام باید علامت گذاری شوند (نام جسد، شماره موجود یا نام مستعار شخص، تاریخ جمع آوری و غیره)
تثبیت موادبرای تسریع فرآیندهای متابولیک و حفظ ساختارها از پوسیدگی ضروری است. تثبیت اغلب با استفاده از یک لایه کاغذ در یک محیط تثبیت کننده حاصل می شود که می تواند الکل های ساده و فرمالین و عوامل تاشونده Carnoy، فیکساتور Zinker و غیره باشد. فیکساتور باعث دناتوره شدن پروتئین و در نتیجه سرعت بخشیدن به فرآیندهای متابولیک و حفظ ساختارها در حالت اولیه می شود. تثبیت را می توان با انجماد (خنک کردن با CO2، نیتروژن کمیاب و غیره) نیز به دست آورد. شدت تثبیت توسط آخرین لایه بافت یا اندام پوست تعیین می شود.
پر کردن لباس در وسط تنگه(پارافین، کل، رزین) یا انجماد برای آماده سازی بیشتر مقاطع نازک.
آماده سازی برش هابر روی ابزارهای مخصوص (میکروتومی یا اولترامیکروتومی) با کمک چاقوهای مخصوص. برش ها برای میکروسکوپ نوری به یک اسلاید چسبانده می شوند و برای میکروسکوپ الکترونی روی شبکه های مخصوص نصب می شوند.
Zabarvlennya zrіzivیا کنتراست وجود ندارد (برای میکروسکوپ الکترونی). قبل از بستن برش ها، وسط ضخیم شده برداشته می شود (پارافین زدایی). بشکه ها کنتراست ساختارهای زیر را به دست می آورند. زرشک به بازی، اسیدی و خنثی تقسیم می شود. پرمصرف ترین آنها زرشک های اساسی (به نام هماتوکسیلین) و اسیدها (ائوزین) هستند. بارناکل های تاشو اغلب به صورت ویکوریستی رشد می کنند.
روشنایی چشم(در زایلن، تولوئن)، در رزین (بالزام، پلی استایرن) قرار داده شده، با شیشه منحنی پوشانده شده است.
پس از این مراحل متوالی، دارو را می توان در زیر میکروسکوپ نوری بررسی کرد.
برای اهداف میکروسکوپ الکترونیدر مراحل آماده سازی آماده سازی، ویژگی ها یا خود اصول اساسی وجود دارد. نگرانی اصلی در این واقعیت نهفته است که آماده سازی بافت شناسی برای میکروسکوپ نوری می تواند برای یک زمان دشوار ذخیره شود و عاری از آلودگی باشد. برش های میکروسکوپ الکترونی یکبار مصرف هستند. هنگامی که اولین جسم آماده می شود، نیاز به دفع، عکس برداری و کاشت ساختارها با استفاده از الکترونوگرام انجام می شود.
از پارچه هایی با قوام کمیابفرآورده های (خون، مایع مغزی نخاعی و...) از ظاهر شدن اسمیر روی لام تهیه می شود که آن ها نیز ثابت، تهیه و سپس آزمایش می شوند.
اندام های پارانشیمی شکننده Zi(کبد، نیرکا و دیگران) آماده سازی برای ظاهر اندام تهیه می شود: پس از یک عضو شکسته یا پاره شده، یک شی به اندام شکسته اعمال می شود که برگردان های بافت روی آن چسبانده می شود. سپس دارو تثبیت، تهیه و تجویز می شود.
زرستا، از بدن های فعال(نسیم، پالپ غشای مغز) یا از بافت کامپوزیتی فیبری کرکی، آماده سازی فلوتاسیون با کشش یا له کردن بین دو لیوان، همچنین با تثبیت مرحله ای، پارس کردن و ریختن در رزین تهیه می شود.
4. روش اصلی تحقیقاشیاء بیولوژیکی که در بافت شناسی تجزیه و تحلیل می شوند حمام میکروسکوپی، یعنی بررسی آماده سازی بافت شناسی زیر میکروسکوپ. میکروسکوپی می تواند یک روش درمانی مستقل باشد، اما در غیر این صورت می توانید از روش های دیگر (هیستوشیمی، هیستورادیوگرافی و ...) استفاده کنید. شایان ذکر است که برای میکروسکوپ از طرح های مختلفی از میکروسکوپ ها استفاده می شود که به شما امکان می دهد پارامترهای مختلف اجسامی را که در حال اندازه گیری هستند بخوانید. اینها از هم جدا شده اند انواع میکروسکوپ:
میکروسکوپ نوری (اندازه جداگانه 0.2 میکرومتر) پیشرفته ترین نوع میکروسکوپ.
میکروسکوپ فرابنفش (اندازه جداگانه 0.1 میکرون)؛
میکروسکوپ فلورسنت (فلورسنت) برای شناسایی مواد شیمیایی در ساختارهایی که قابل مشاهده هستند.
میکروسکوپ فاز کنتراست برای کاشت ساختارها در آماده سازی بافت شناسی حفظ نشده.
میکروسکوپ پلاریزاسیون برای کاشت، رتبه سر، ساختارهای فیبری.
میکروسکوپ میدان تاریک برای تصویربرداری از اجسام زنده.
میکروسکوپ نور حادثه برای بررسی اجسام جامد.
میکروسکوپی Elektronna (ساختمان Rodlnu تا 0.1-0.7 نیوتن متر)، دو ї RISNOVIDIS (Transmіsіina) الکتروسکوپ I Smanirov Miroproscope of Divine Divine Superput.
روشهای هیستوشیمیایی و سیتوشیمیاییبه شما امکان می دهد ذخیره سازی مواد شیمیایی را تعیین کنید و استحکام آنها را در ساختارهایی که تحت درمان هستند تعیین کنید. این روش مبتنی بر واکنش‌های شیمیایی است که با یک معرف و مواد شیمیایی موجود در بستر، با یک محصول واکنش ایجاد شده (کنتراست یا فلورسنت) انجام می‌شود، که سپس در نور یا شب تاب و میکروسکوپ شناسایی می‌شود.
روش هیستو اتورادیوگرافیبه شما امکان می دهد ذخیره سازی مواد شیمیایی در ساختارها و شدت تبادل برای گنجاندن ایزوتوپ های رادیواکتیو برای ردیابی ساختارها را شناسایی کنید. این روش اغلب در آزمایشات روی حیوانات استفاده می شود.
روش سانتریفیوژ دیفرانسیلبه شما این امکان را می دهد که اطراف اندامک ها و قطعات نخی که از بافت قابل مشاهده است بچرخانید. برای این منظور بافت را روی اندام آسیاب کرده، آن را با محلول فیزیولوژیکی پر کنید و سپس در سانتریفیوژ با لفاف‌های مختلف (از 2 تا 150 هزار) بچرخانید و کسری‌هایی را که جمع‌آوری می‌شوند جدا کنید و سپس جمع‌آوری می‌شوند. آنها امیدوارند از روش های مختلف استفاده کنند.
روش تداخل سنجیبه شما امکان می دهد جرم خشک گفتار را در اشیاء زنده و ثابت تعیین کنید.
روش های ایمونومورفولوژیکیعلاوه بر واکنش های اولیه ایمنی، بر اساس برهمکنش آنتی ژن-آنتی بادی، امکان شناسایی زیرجمعیت های لنفوسیت ها، تعیین مرحله بیگانه بودن سلول ها، انجام تایپ بافتی بافت و اندام ів (به معنی هیستوسیتنسی) برای پیوند اعضا را می دهد. .
روش کشت کلیتین(in vitro, in vivo) تشخیص سلول ها در نمونه ها یا در کپسول های ویژه در بدن و آزمایش بیشتر سلول های زنده زیر میکروسکوپ.
تنها چند گونه وجود دارد که در بافت شناسی مورد مطالعه قرار می گیرند
برای تجسم ساختارها در میکروسکوپ نوری، میکرومترها مهم هستند: 1 میکرومتر تبدیل به 0.001 میلی متر می شود. در میکروسکوپ الکترونی، نانومتر را تغییر دهید: 1 نانومتر تبدیل به 0.001 میکرون می شود.
5. U تاریخچه توسعه بافت شناسیذهنی سه را ببینیددوره زمانی:
دوره قبل از میکروسکوپی(از قرن چهارم قبل از میلاد تا 1665 ر.) با نام های ارسطو، جالینوس، ابن سینا، وسالیوس، فالوپیا مرتبط است و با آزمایش های مشاهده بافت های ناهمگن (سخت، نرم، نادر و غیره) در بدن حیوانات و انسان مشخص می شود. و بهترین روش های تشریح تشریحی
دوره میکروسکوپی(Z 1665 تا 1950). آغاز این دوره با نام فیزیکدان انگلیسی رابرت هوک همراه است، که در وهله اول میکروسکوپ را بهبود بخشید (به یاد داشته باشید که اولین میکروسکوپ ها در اوایل قرن هفدهم یافت شدند) به عبارت دیگر، برای بررسی سیستماتیک نتایج آنها، تعداد اشیاء بیولوژیکی و انتشار نتایج این مطالعات در 1665 روبل. در کتاب «ریزنگاری» در قرن سوم، اول، اصطلاح «کلیتینا» (سلولوم) معرفی شد. توسعه بیشتر میکروسکوپ ها و توسعه بیشتر بافت ها و اندام های بیولوژیکی آنها ادامه یافت.
احترام خاصی به تاکستان بودوا داده شد. یان پورکنژ وجود "پروتوپلاسم" (سیتوپلاسم) و هسته‌ها را در سلول‌های موجودات توصیف کرد و بعداً R. Brown وجود هسته و سلول را در بیشتر موجودات تأیید کرد. M. Schleiden، گیاه شناس، با فعالیت سلول های دارای سیتوکنز گیر کرد. نتایج این مطالعات به تی شوان اجازه داد تا بر اساس اطلاعات خود، نظریه کلینت (1838-1839) را بر اساس سه اصل تدوین کند:
همه موجودات در حال رشد و ایجاد شده از سلول تشکیل شده اند.
همه سلول ها بر اساس اصل اساسی از سیتوبلاستوم ها رشد می کنند.
سلول پوست دارای نشاط مستقل است و سرزندگی بدن مجموع فعالیت سلول ها است.
با این حال، R. Virkhov (متولد 1858) روشن نکرد که رشد سلول ها تحت تأثیر مسیر زیر سلول خروجی است (خواه سلول از سلول باشد). اصولی که توسط تی شوان، نظریه اقلیمی، توسعه یافته است، امروزه نیز مرتبط هستند، اگرچه آنها به طور متفاوتی فرمول بندی شده اند.
مفاد فعلی نظریه سلولی:
سلول کوچکترین واحد موجودات زنده است.
سلول های موجودات و موجودات مشابه خانواده آنها.
تولید مثل سلول ها توسط مسیری در زیر سلول خروجی ایجاد می شود.
ارگانیسم های چند سلولی مجموعه های پیچیده ای از سلول ها و سلول های مشابه هستند که در سیستم های بافتی و اندام ها متحد شده اند و توسط اشکال تنظیم سلولی، هومورال و عصبی به هم مرتبط هستند.
توسعه بیشتر میکروسکوپ ها، به ویژه استفاده از لنزهای آکروماتیک، شناسایی ساختارهای مختلف در سلول ها را ممکن ساخت:
مرکز بالینی هرتویگ، 1875;
دستگاه ذرات یا کمپلکس جزئی بشقاب گلژی، 1898;
میتوکندری Bend، 1898
مرحله فعلیتوسعه بافت شناسی در سال 1950 آغاز شد. از ابتدای کشف میکروسکوپ الکترونی، کاشت اشیاء بیولوژیکی، اگرچه میکروسکوپ الکترونی زودتر پیدا شد (E. Ruska، M. Knoll، 1931). با این حال، مرحله فعلی توسعه بافت شناسی با استفاده از میکروسکوپ الکترونی نه تنها، بلکه از روش های دیگر نیز مشخص می شود: هیستوشیمی سیتوشیمیایی، هیستورادیوگرافی و سایر روش های بیش از حد. در این مورد، مجموعه‌ای از تکنیک‌های متنوع استفاده می‌شود که نه تنها نشانه‌های واضحی از ساختارهایی که تحت تأثیر قرار می‌گیرند، بلکه شناسایی ویژگی‌های دقیق را نیز امکان‌پذیر می‌سازد. تکنیک‌های مورفومتریک مختلف مبتنی بر سیستم‌های خودکار برای پردازش اطلاعات جمع‌آوری‌شده با استفاده از رایانه، به‌طور گسترده مورد استفاده قرار می‌گیرند.
سخنرانی 2. سیتولوژی. سیتوپلاسم
اشیاء مورد بررسی می توانند سلول ها و بافت های ثابت (مرده) یا زنده باشند.
برای بررسی ریزساختار پنیرها و محصولات غذایی، به عنوان یک قاعده، از ویکوریستیک بافت ها و بافت های ثابت استفاده می شود. این داروها یا آنی هستند، برای تزریق یک بار مصرف در نظر گرفته شده اند، یا دائمی هستند که می توان آنها را ذخیره کرد و به طور گسترده تحت نظارت قرار داد. علاوه بر این، از آماده سازی کامل و کامل استفاده می شود.
آماده سازی به موقعمی توانید یک شویدکوی صاف تهیه کنید. برای این منظور، مواد را ثابت می‌کنند و برش‌هایی را روی میکروتوم منجمد می‌کنند؛ در صورت وجود، می‌توان بخش نازکی از بافت یا اندام را با چاقوی جراحی یا تیغه ایجاد کرد. بخش های بریده شده را پوست بگیرید، آنها را روی یک اسلاید شیشه ای قرار دهید، سپس یک قطره گلیسیرین بمالید و با یک لیوان منحنی بپوشانید. برای شناسایی نشاسته، ید را در یدید پتاسیم حل کنید: 0.5 گرم یدید پتاسیم را در مقدار کمی آب حل کنید، 1 گرم یدید کریستالی اضافه کنید و آب را به 100 سانتی متر مکعب اضافه کنید. مقداری از معرف را روی یک تکه نازک گاو باس، پودر یا مواد دیگر بمالید، روی یک اسلاید پخش کنید تا نشاسته به رنگ آبی-بنفش تبدیل شود.
آماده سازی کامل یا کاملردیابی بدون برداشتن بافت اندام. به عنوان مثال، یک سلولز زیرپوستی ریخته شده یا یک آماده سازی له شده ریشه ریشه پس از تثبیت، شستشو و آماده سازی باید بین جسم و شیشه منحنی قرار گیرد. برای شناسایی سایر عناصر ساختاری تکه های ثابت و تخمیر شده سلول لگن یا بافت گوشتی صاف، با پوست برهنه روی یک اسلاید بچینید - چنین آماده سازی هایی را نیشگون گرفتن می نامند. در تعدادی از موارد، به عنوان مثال، پس از تثبیت و شستن پوست، مخلوط را حذف نکنید، زیرا در سلول ها ادخال های آلی (رنگدانه) وجود دارد که ممکن است zabarvlennya طبیعی باشد.
روش های تهیه نمونه بافت شناسیروش اصلی پیوند سلول ها و بافت های ثابت بافت شناسی است. بررسی پارچه میله ای که در یک مرکز ویژه قرار داده شده است. برای از بین بردن برش ها، مواد تمام شده را در پارافین یا مواد کامل بریزید، که به شما امکان می دهد برش های نازک (5-7 میکرومتر یا 10-30 میکرومتر به صورت افقی) را برش دهید، برای آماده سازی صاف برش ها (40-60 میکرومتر) از تجهیزاتی استفاده کنید که یخ زدگی.
مراحل اصلی تهیه یک آماده سازی بافت شناسی: نمونه برداری، تثبیت، شستشو، آبیاری، ریختن تا پارافین یا کامل، آماده سازی، قرار دادن زیر یک سطح منحنی.
انتخاب نمونهبرای اطمینان از بررسی و ساختار مناسب مواد انجام می شود. اندازه نمونه به طور متوسط نباید بیشتر از 2.5-3.0 سانتی متر باشد.نمونه های کبد و طحال از کپسول گرفته می شود. از قلب، قطعات قلب قدامی برداشته می شود، قطعات غشاء نازک تر می شوند و در یک آماده سازی می توان ظاهر توپوگرافی اپی کارد، میوکارد و اندوکارد را تعیین کرد. از قسمت پایین، غدد لنفاوی و غدد فوق عصبی، بخش هایی از اندام ها کشیده می شود، به طوری که زاویه عمود بر سطح است به طوری که وریدهای گردنی و مغزی روی آماده سازی قابل مشاهده است. در صورت نیاز به آماده سازی آماده سازی برای تغییر اندام ها، ضایعات مواد ردیابی شده در حلقه با ناحیه آسیب دیده بریده می شوند، به طوری که نمونه منطقه انتقال حفره را از دست داده است. نمونه های ماهیچه های اسکلتی باید به گونه ای بریده شوند که الیاف گوشت در قسمت های بعدی و عرضی قرار گیرند. نمونه‌های گوشت چرخ کرده و سایر موادی که الک می‌شوند را ابتدا روی یک گاز قرار دهید و با نخ ببندید. توجه به این نکته ضروری است که وقتی حفره قفسه سینه رشد می کند، پاها به دلیل خاصیت ارتجاعی به هم می ریزند، به این معنی که سبکی خود را از دست می دهند، سپس یک لیوان یا لوله هیومیک را وارد نای اندام های تنفسی کرده و به تدریج از طریق آن تزریق می کنند. . یک بند بخیه را روی نای زیر لوله قرار داده شده اعمال کنید و یک بخیه ببندید تا کاملا بسته شود. برای تثبیت روده، ابتدا بخش را با لیگاتورهای دو طرف به اندامی که برای تثبیت تعیین شده است ببندید. نمونه ها با برچسب هایی از یک کاغذ ضخیم با برچسب شماره و تاریخ انتخاب نمونه مهر می شوند.
تثبیت، tobto. صرفه جویی در معماری طبیعی (زنده)، که به منظور انتقال پروتوپلاسم زنده سازه ها به حالت تغییرناپذیر انجام می شود. اثر فیکساتورها در این واقعیت آشکار می شود که در بافت ها و اندام ها، در نتیجه فرآیندهای بیوفیزیکی، انعقاد برگشت ناپذیر پروتئین ها رخ می دهد. با برداشتن بافت از یک عضو، بهتر است آن را در فیکساتور قفل کنید. نسبت بین مواد و نسبت ثابت کمتر از 1:9 نیست (شکل 3).
تثبیت منجر به تقویت و تغییر خاصی در وظیفه بیان می شود. بیشترین استفاده برای تثبیت فرمالدئید 12-10 درصد، اتیل الکل و استون است. برای تهیه غلظت مشخص شده از ماده تثبیت کننده، فرمالدئید 40% با آب لوله کشی رقیق می شود. اتیل الکل (100٪ مطلق یا 96٪) در این موارد استفاده می شود، اگر لازم باشد موادی که در فیکساتورهای آب حل می شوند (مثلا گلیکوژن) شناسایی شوند. مواد تحقیقاتی (مثلاً مغز) برای بیش از چند سال در استون ثابت می شود. اگر قرار باشد اندام آسیب دیده مانند بافت کیستیک برداشته شود، کلسیفیکاسیون یا التهاب انجام می شود. برای انجام این کار، یک تکه کوچک برس (یا بهتر است بگوییم آن را روی یک نخ آویزان کنید) در محلول آب 5-8٪ پایین بیاورید. اسید نیتریک، که در هر قطعه 2-3 بار تعویض می شود نتیجه کلسیفیکاسیون را می توان با قرار دادن یک سر نازک در برس قضاوت کرد: در صورت عدم وجود تکیه گاه، کلسیم زدایی کامل می شود. پس از چنین طرفداری
شستشوبرای برداشتن قسمت سرسخت فیکساتور انجام شود، به عنوان مثال، پس از تثبیت با فرمالین، شستشو با آب جاری انجام می شود.
Znevodnennyaبرای سخت شدن مواد در اتیل الکل با غلظت اولیه: 50-70-100. برای تهیه الکل 50 و 70 درصد الکل 96 درصد را با آب مقطر رقیق کنید. برای تهیه الکل 100 درصد باید سولفات مس را سرخ کرد تا کاملا آب شود و اتیل الکل 96 درصد را به پودر سفید اضافه کرد. در غلظت الکل پوست، بسته به اندازه بافت، اندام، این ماده 1-24 سال دوام می آورد. با 70 درصد الکل، می توان مواد را با کشش چند لایه برش زد.
زالیوانیابه گونه ای انجام شود که پیگیری چشم ها سخت شود که به شما امکان می دهد نماهای نازکی را نگه دارید. برای این منظور از پارافین (دوره نفوذ 1-4 سال)، مواد کامل (دوره نفوذ سه سال) استفاده کنید. اگر چربی ها شناسایی شدند، برای ردیابی بافت ها و اندام های کرکی، ژلاتین را بریزید.
منظرهاز میکروتوم های سورتمه یا چرخشی استفاده کنید. نازک ترین بخش ها (5-7 میکرون) را می توان از مواد جاسازی شده در پارافین تهیه کرد. مواد پر شده با سولدین با ضخامت 20-15 میکرون تهیه می شود. برای بررسی ریزساختار پنیر و محصولات غذایی، معمولاً از فناوری انجماد استفاده می شود. این کار سرعت آماده سازی دارو را افزایش می دهد و سه مرحله آبیاری و غرقابی خاموش می شود. پس از تثبیت و شستن، بافت های جسم روی یک مرحله میکروتوم نرم که منجمد می شود قرار می گیرد و به قسمت هایی به ضخامت 60-40 میکرومتر برش می شود. مناظر را با پنزلیک به آب می برند و بوی تعفن صاف می شود و با ظاهر نازک ترین لخته های خاکستری متورم می شود.
تهیه محصولاتبرای افزایش کنتراست ساختارهای مختلف در آماده سازی های در نظر گرفته شده برای بررسی زیر میکروسکوپ نوری. فرآیند فاربینگ شامل فرآیندهای شیمیایی و فیزیکی پیچیده است، بنابراین هنگام انتخاب روش، از سازگاری انتخابی ساختارهای بافت با پرندگان آوازخوان با خواص فیزیکی و شیمیایی مختلف اطمینان حاصل کنید.
زرشک ها به دو دسته اصلی (پایه)، ترش و خاص تقسیم می شوند. سازه هایی که توسط بربرهای اصلی تهیه می شوند نامیده می شوند بازوفیلیک،زرشک ترش - اکسی دوست، اسیدوفیل، ائوزینوفیلیک.
زغال اخته اصلی (پایه ای) حاوی هماتوکسیلین است که هسته های کروماتین و سایر ساختارهای حاوی پروتئین های آبی یا بنفش را آماده می کند. کارمین که هسته گیلاس های روشن را تشکیل می دهد، سافرانین - گیلاس تیره، تیونین - بلوز.
از زرشک ترش، ائوزین (سیتوپلاسم را به اریسیپل تزریق می کند)، اسید پیکریک (رنگ زرد)، سرخابی (رنگ اولیه)، کارمین نیلی (رنگ آبی) اضافه می شود.
هنگامی که ریزساختار پنیر و محصولات غذایی مورد مطالعه قرار گرفته است، اغلب با هماتوکسیلین و ائوزین ترکیب می شود. برای این منظور هماتوکسیلین را به مدت 1-3 دقیقه از آب منتقل کنید. 20-30 دقیقه با آب بشویید، 3-5 دقیقه ائوزین را در دهان بگذارید و 3-5 دقیقه با آب بشویید. آبی که از بین می رود با یک کاغذ صافی خارج می شود، یک قطره اتیل الکل 96٪ به مدت 1-2 دقیقه ریخته می شود و در محلول 25٪ اسید کربولیک در زایلن یا تولوئن آبیاری می شود. سپس 1-2 قطره از مومیایی کردن را روی برش بمالید و با یک لبه منحنی بپوشانید.
برای بارونیکی که ادغام های چرب تهیه می کنند، اغلب ویکوریستا سودان 111. برای تهیه رزماری بارونیک در 95 سانتی متر مکعب الکل اتیلیک 85 درصد، 5 سانتی متر مکعب استون اضافه کنید و پودر سودان III را بریزید تا گل رز خیس شده از بین برود (بارونیکی هم باید مالیده شود. زیاد). مخلوط تا 50% گرم شده و فیلتر می شود. نمونه ها که روی میکروتوم منجمد گرفته شده اند، به مدت 1-2 دقیقه در اتیل الکل 50 درصد و سپس به مدت 25 دقیقه در سودان III قرار می گیرند. چشم ها را با الکل 50 درصد بشویید، با آب مقطر بشویید و در گلیسیرین-ژلاتین قرار دهید.
قطرات چربی خنثی به رنگ نارنجی تبدیل می شود تا سودان III در چربی ها تجزیه شود. آخال های چربی را می توان با اسید اسمیک نیز تشخیص داد و ساختارهای چربی سیاه می شوند.
Vysnovok در زیر شیب منحنیدر وسط انجام دهید تا باد را وارد نکنید و برش را برای مدت طولانی حفظ کنید. مایع را باید با الکل های با قدرت رشد رقیق کرد و در زیر سطح در جالیک، بلسان کانادایی یا گلیسیرین-ژلاتین قرار داد (دارو نباید با الکل ها یا زایلن به هم بچسبد).
آماده سازی آماده سازی قبل از میکروسکوپ الکترونی.برای بررسی اشیاء بیولوژیکی از دو نوع میکروسکوپ الکترونی استفاده می شود: انتقال (انتقال) و روبش (رستر).
اصل پردازش یک جسم برای بررسی در میکروسکوپ الکترونی، که نیمه شفاف است، بر اساس همان اصول میکروسکوپ نوری است: نمونه برداری، تثبیت، شستشو، آبگیری، ریختن، تهیه تصاویر بسیار نازک، کنتراست.
انتخاب نمونهبا هدف مطالعه ساختار ماده، با پیروی از قوانین مشابه برای میکروسکوپ نوری انجام شد. حجم نوارهای مواد نهایی نباید از 1 میلی متر مکعب تجاوز کند. هدف اصلی متافیکساسیون حفظ بافت یاکموگ تا حد امکان نزدیک به عمر طبیعی آن است.
تثبیتبرای حفظ بهترین ساختارها، لازم است که معرف هایی را که بر pH و ایزوتونیسیته تأثیر می گذارند، منجمد کنید، که مقادیر آنها با توجه به نوع بافت ثابت تعیین می شود. فرآیند تثبیت در دو مرحله انجام می شود: پیشوند و پس تثبیت. برای پیش تثبیت، از 2.5-3٪ گلوتارآلدئید (pH 7.2-7.4) استفاده کنید، دوره تثبیت 2-4 سال است. پس از تثبیت 2٪ (pH 7.2-7.4) - 1-2 سال طول می کشد. برای حفظ ساختار باقیمانده، توصیه می شود از یک تثبیت کننده در دمای پایین (0-4 درجه سانتیگراد) استفاده کنید و با استفاده از ترکیبات فسفات-بافر، کاکودیلات و ویرو-نال-استات فیکساتور تهیه کنید.
شستشوبا 30٪ الکل سرد 5-7 بار انجام می شود، قسمت های پوستی الکل به مدت 30 دقیقه روی جسم قرار می گیرد، سپس. فیکساتور را فشار دهید تا عمل اکسیداتیو فیکساتور شروع شود.
Znevodnennyaبا اتیل الکل های با غلظت بالا: 30، 50، 70، 96، 100٪ به مدت 30 دقیقه انجام دهید. هنگام استفاده از روش های خاصی برای پر کردن برای آبیاری، توصیه می شود استون و اکسید پروپیلن را نیز اضافه کنید.
زالیوانیابرگزار شود رزین های اپوکسی(ارالدیت، ایپون تا در.). پلیمریزاسیون رزین ها در کپسول ها در یک ترموستات در دمای 60 درجه سانتی گراد تا زمانی که سخت شوند، معمولاً با کشش 1-2 دسی بل انجام می شود.
چشم های فوق العاده نازکبا کمک چاقوهای شیشه ای روی یک اولترامیکروتوم نگه دارید، که برای آن بلوک های اپوکسی به شکل یک هرم کوتاه چند وجهی تیز می شوند. نسخه های سریال رنگ خاکستری باید در حمام با اتیل الکل 10٪ مصرف شود. قسمت های برش خورده روی نشیمن های مسی یا پالادیومی نصب می شوند که ابتدا مذاب حاصل از قالب روی سطح آن اعمال می شود. برای شناسایی ساختارهای لازم، ذرات روی صفحه ها با سیترات سرب و اورانیل استات تصفیه می شوند.
برای میکروسکوپ الکترونی روبشیباید آثار آثار را ثابت کرد و با توجه به آثار آثار در وضعیت مناسبی نگه داشت و به عنوان تثبیت کننده استفاده کرد. پس از آبیاری، گل ها را به شی تریماچ می چسبانند، فایل ها را در محل نصب قرار می دهند و با بهترین توپ طلا یا پلاتین می پوشانند. به جای میکروسکوپ الکترونی، که نیمه شفاف است، می توان از مواد خورنده برای اسکن استفاده کرد: شی مورد درمان با نوعی مواد سخت کننده ریخته می شود و پس از آن چسبناک و سطحی به نظر می رسد. ماکت هایی نیز وجود دارند که مسیر انجماد - تراشه را دنبال می کنند. در این حالت بریدگی سطح جسم باید رعایت شود. برای افزایش کنتراست، ماکت‌ها باید با براده کردن ذرات فلزی (طلا، پلاتین) یا وژیل ساخته شوند.
غذا را کنترل کنید
